目的:本研究应用单穴与腧穴配伍点穴疗法干预治疗功能性消化不良模型大鼠,结合代谢组学及UPE技术,通过对比观察治疗前后功能性消化不良大鼠代谢产物含量与特定部位UPE强度变化,科学论证推拿点穴疗法治疗功能性消化不良的有效性,初步探讨应用不同腧穴点穴治疗功能性消化不良效应机制的差异,为推拿临床治疗和选穴提供科学依据。方法:本研究为动物实验研究,从胃肠动力学与组织形态学讨论功能性消化不良大鼠造模质量;由代谢组学与超微弱发光强度两个客观检测指标讨论推拿点穴疗法的有效性以及单穴与腧穴配伍点穴疗法疗效的差异性。选用60只SPF级健康Wistar大鼠,随机分为5组,即空白组、模型组、配穴组、中脘组和胃俞组,每组12只。除空白组12只大鼠外,其他48只大鼠进行造模,模型建立采用复合病因造模法(包括夹尾刺激和不规律饮食)制备功能性消化不良大鼠模型,共14天。造模结束后,于每组随机抽取共10只大鼠腹部解剖观察大鼠胃及十二指肠并做HE染色切片确定大鼠无器质性病变,并检测胃肠道的动力功能检验功能性消化不良大鼠造模质量;造模第3周起,模型组每日接受抓取固定刺激;配穴组予以推拿器点按中脘、胃俞穴治疗,中脘组予以推拿器点按中脘穴治疗,胃俞组予以推拿器点按胃俞穴治疗治疗,治疗每个穴位5min/次,7d为一疗程,疗程间休息2d,共治疗2个疗程。在实验期间测量记录大鼠的体重与食量,并观察大鼠的体态及行为学变化。治疗结束后提取大鼠腹主动脉血清,应用超高效液相色谱-Q-TOF MS对血清进行非靶向代谢组学进行分析并研究其机制;随机选取3只大鼠血清进行超微弱发光检测,观察不同腧穴配伍推拿点穴疗法对功能性消化不良大鼠血清代谢产物的影响;以正负离子代谢产物以及其可能关联的通路为作用机制研究指标,分析应用不同腧穴治疗功能性消化不良效应机制的差异。结果:1功能性消化不良大鼠造模结果:各组体重记录分析得出造模前,各组无明显差异(P>0.05);造模2周后,模型组、配穴组、中脘组和胃俞组在与空白对照的差异达到了显著水平(P<0.01);大鼠经过治疗后,通过比较发现模型组体重低于配穴组、中脘组、胃俞组和空白组并具有差异(P<0.05);中脘组、胃俞组大鼠在体重上与配穴组间的差异并不显著(P>0.05)。胃肠动力学检测显示造模2周后,模型组、配穴组、中脘组和胃俞组与空白组比较胃内残留率明显升高,小肠推进率明显下降,并有显著差异(P<0.01)。大鼠胃组织HE染色切片显示模型组、配穴组、中脘组和胃俞组大鼠胃部无器质性病变。2代谢组学研究结果:通过对质量控制(QC)试验数据进行分析,发现本次所得数据在预期范围内,且仪器在运行过程中未出现错误,说明试验数据可用。通过代谢谱差异性分析进行样本间生物学差异的研究。各组血清代谢产物比较正负离子均有差异,通过Fisher精确检验方法对各组的差异表达代谢物进行KEGG通路富集分析,结果表明,模型组与空白组比较,蛋白质消化吸收,氨酰生物合成,矿物质的吸收,ABC转运蛋白,精氨酸生物合成等重要通路发生了显著变化;配穴组与模型组比较,蛋白质消化吸收,氨酰生物合成,矿物质的吸收,ABC转运蛋白等重要通路发生了显著变化;中脘组和胃俞组与配穴组比较,蛋白质消化吸收,氨酰生物合成等通路发生了变化。3超微弱发光强度测试结果:超微弱发光强度(PMT)测试结果显示治疗后配穴组、中脘组、胃俞组和空白组与模型组比较胃部发光增强并有显著差异(P<0.01);配穴组与中脘组和胃俞组比较胃部发光增强并有差异(P<0.05)。结论:1通过功能性消化不良大鼠推拿点穴治疗前后的对照,推拿点穴疗法在促进胃肠动力方面疗效确切,证明了推拿点穴疗法治疗功能性消化不良的有效性。2通过代谢组学研究证明,一系列正负离子代谢物偏离常态是功能性消化不良大鼠血清代谢的共同特点,单穴与腧穴配伍点穴可通过影响多种重要通路达到治疗目的,单穴与腧穴配伍点穴治疗功能性消化不良大鼠影响的相关通路不同,说明其效应机制有一定差异。3通过超微弱发光强度测试证明,单穴与腧穴配伍点穴推拿疗法可显著增强功能性消化不良大鼠的胃部超微弱发光强度(PMT),结合代谢组学分析说明推拿疗法的相关机制可能与蛋白质消化吸收、膜运输、多种氨基酸合成等能量变化相关。不同腧穴配伍点穴推拿治疗对功能性消化不良大鼠的超微弱发光强度的影响具有一定差异,配穴组的超微弱发光强度更强,说明腧穴配伍治疗的效应机制可能与更多能量代谢变化相关,为今后探究腧穴配伍治疗与能量关系开展类似超微弱发光研究提供了实验基础。4在临床上,研究中发现腧穴配伍在推拿上具有重要的作用,中脘、胃俞配穴点穴治疗功能性消化不良具有良好的治疗效果;另一方面证实,单穴与腧穴配伍点穴治疗功能性消化不良的效应机制与多种重要通路密切相关且应用不同穴位的效应机制有一定差异,从临床和生物学机制角度,为推拿临床治疗和选穴打下了理论基础。