TPX2、Aurora-A和PCNA在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

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脑胶质瘤是一种常见的原发性颅内恶性肿瘤,约占颅内肿瘤的46%。由于胶质瘤多呈侵袭性生长,血供丰富,且生长速度快,与正常脑组织分界不清,具有手术完全切除困难术后放化疗效果差,复发率高等特点,严重威胁着患者的健康。为了提高胶质瘤患者的生存质量,拓展胶质瘤的治疗方法,关于脑胶质瘤的研究逐渐成为热点,相关的研究不断深入。胶质瘤的形成是多因素、多种机制共同影响下神经胶质细胞发生一系列的复杂的改变的过程。生命之所以能够延续下去归根结底是由于母细胞不断的分裂,子细胞不断地产生。我们通常将从子细胞的产生开始到下一次形成子细胞的过程定义为一个细胞周期。由于体细胞增殖的过程都要经过细胞有丝分裂,细胞周期的稳定尤为重要。胶质瘤的形成过程中往往有细胞周期紊乱,染色体复制异常,多倍体异倍体形成。因此,细胞周期改变对肿瘤调控格外重要。细胞有丝分裂期间,染色体严密地进行分裂需要依靠纺锤体及时有效准确的发挥其作用,然而纺锤体则是由具有不同功能的蛋白骨架(微管)组成。微管的形成受多种相关蛋白的调节,靶向Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesin-like protein2,TPX2)和极光蛋白(serine/threonine-protein kinase6, Aurora-A)是最新发现的两种与微管有密切关联的蛋白,可激发并调控纺锤体的成熟以及细胞中心体的复制、成熟和分裂。目前发现,乳腺癌、卵巢癌和食管癌等的发生与二者有着极其密切的联系。因此,微管组装和调控对细胞分裂以及肿瘤的形成具有重要意义。目的:本研究旨在了解增殖细胞核抗原(Proliferating Cell NuclearAntigen简称PCNA)、TPX2和Aurora-A在不同级别人脑胶质瘤中的表达情况,并以PCNA为阳性参照,探讨TPX2和Aurora-A对胶质瘤的发生、发展中的作用以及二者相关性。方法:本研究采用免疫组织化学的方法,检测TPX2、Aurora-A和PCNA在50例不同级别人脑胶质瘤组织和10例正常人脑组织(内减压和皮层造瘘切除的脑组织)中的表达情况。按照WHO(2007年修改)神经上皮组织肿瘤分类标准病理诊断,利用随机数字表随机选取低度恶性组Ⅱ级和高度恶性组(Ⅲ级和Ⅳ级)各25例,正常脑组织组10例。所有标本术前均未接受放化疗。对三者的结果分析采用半定量分析方法,对阳性染色结果进行评分,即在高倍视野(400×)随机选择五个区域,每个区域计数100个细胞,以胞核及胞浆出现黄色或棕黄色着色为阳性表达。着色评价如下:0分代表无染色;1分代表弱着色;2分代表轻度着色;3分代表重度着色。细胞评价如下:0分代表没有肿瘤细胞;1分代表肿瘤细胞占0%~10%;2分代表肿瘤细胞占11%~50%;3分代表肿瘤细胞占50%以上。两种得分相加介于0-1分为"-";介于2-3分为"+";4-5分为"++";6-9分为"+++"。通过分值的累积值来判断三者的表达情况,进而来分析三者与有丝分裂的关系。实验数据采用SPSS17.0软件进行统计学处理。结果:TPX2在正常脑组织中均未见表达,在胶质瘤组织中的阳性表达率为62.0%(31/50),其中,II级阳性表达的有11例,Ⅲ-Ⅳ级中阳性表达的有20例,χ2=19.315,P <0.01,正常对照组,Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级三组之间TPX2的表达有统计学差异。Aurora-A在正常脑组织中均未见表达,在胶质瘤组织中的阳性表达率为56.0%(28/50),其中,Ⅱ级阳性表达的有10例,Ⅲ-Ⅳ级中阳性表达的有18例,χ2=15.643,P <0.01,正常对照组,Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级三组之间Aurora-A的表达有统计学差异。PCNA在正常脑组织中均未见表达,在胶质瘤组织中的阳性表达率68.0%(34/50),其中,Ⅱ级阳性表达的有12例,Ⅲ-Ⅳ级中阳性表达的有22例。应用SPSS17.0软件处理数据,χ2=21.530,P <0.01,正常对照组,Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级三组之间PCNA的表达有统计学差异。胶质瘤中Aurora-A和TPX2的表达呈正相关(r=0.521,P<0.01)。通过随访证实Aurora-A、TPX2强阳性表达的患者较二者均阴性或呈弱阳性表达者生存期明显缩短。结论:1TPX2蛋白在脑胶质细胞瘤中表达水平明显高于正常脑组织,而且随着肿瘤分期越晚或组织病理学分级越差,TPX2的表达水平越高。则提示该蛋白与胶质瘤的恶性增殖有密切关系,是脑胶质瘤的恶性生物学特性标志之一。2Aurora-A在胶质瘤中高表达,尤其在高级别胶质瘤中更显著,而正常脑组织中则检测不到Aurora-A表达,该基因是恶性胶质瘤的一个新的标志物,可作为分子治疗的靶点之一。3PCNA是一种常见的细胞核增殖抗原在脑胶质细胞瘤中有阳性表达,而且它的表达水平与脑胶质瘤的分级有关,它在恶性程度高的胶质瘤细胞中表达水平比低级别胶质细胞瘤中的表达水平高。PCNA在胶质瘤组织中高表达提示胶质瘤发生时神经胶质细胞增殖旺盛。目前,以PCNA作为反映细胞核增殖的标记蛋白,已被应用到多种肿瘤增殖性的研究中,本研究也证实PCNA也是脑胶质瘤的一个重要的标记蛋白。4Aurora-A、TPX2和PCNA在正常脑组织中不表达,而在脑胶质瘤中呈显著表达,尤其在高级别脑胶质瘤中更明显,提示Aurora-A和TPX2与细胞增殖有密切的关系,Aurora-A、TPX2之间的相关分析说明二者在脑胶质瘤组织中的表达存在正相关。5通过随访证实Aurora-A、TPX2强阳性表达的患者较二者均阴性或呈弱阳性表达者生存期明显缩短,说明二者特异性高表达可能协同促进胶质瘤的发病和恶性进展,与胶质瘤的恶性程度和预后密切相关。
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