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植物乳杆菌是一种在泡菜、酸奶及动物胃肠道中等发现的能广泛利用植物性碳源、耐受胆盐和低pH的乳酸杆菌。有些植物乳杆菌能产生Ⅱ类细菌素,对大肠菌群、沙门氏菌、志贺氏菌等肠道致病菌有抑制作用。植物乳杆菌产生的Ⅱ类细菌素由天然氨基酸组成,转录后不修饰,是热稳定的疏水肽,该类细菌素的合成受群体感应系统调节控制。课题组从健康婴儿粪便中分离得到的植物乳杆菌ZJ316能产大小约为4.0KD的细菌素,本研究克隆了ZJ316中调控细菌素合成的群体感应系统(Quorum sensing, QS),并对QS中起调节作用的plnC和plnD基因(调节因子,RR)做了初步探析,内容包括：(1)通过Genbank获取与植物乳杆菌编码QS相关基因序列,设计引物,以植物乳杆菌ZJ316基因组DNA为模板,进行PCR扩增。结果显示,ZJ316中存在编码群体感应系统的plnABCD操纵子。并对plnC和plnD基因编码合成的PlnC和PlnD蛋白进行一级结构、理化性质、二级结构和空间结构的预测,结果显示,PlnC和PlnD蛋白结构相似,且都是通过与DNA特定位点的结合实现其各自功能。(2)将plnC和plnD基因分别克隆到原核表达载体pET-32a-SUMO中,构建pET-plnC和pET-plnD重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达。结果表明,重组蛋白在Kana浓度100μg/mL、培养温度37℃、培养时间3h、IPTG浓度0.2mM的条件下进行表达,SDS-PAGE表明表达的重组蛋白皆以包涵体形式存在。(3)将超声破碎后的菌液经Ni-NTA亲和层析柱进行初次纯化,平衡缓冲液为20mM PBS、500mM NaCl、20mM咪唑、pH8.0,洗脱缓冲液为20mM PBS、500mM NaCl、150～300mM咪唑、pH8.0；包涵体复性后,再利用Ni-NTA亲和层析和G200葡聚糖凝胶柱层析进行纯化复性后目标蛋白,得到纯度较高的目标蛋白：之后用SUMO酶切,并用DEAE离子交换柱脱盐纯化目标蛋白,最后用G75葡聚糖凝胶柱层析精制蛋白,得到大小都约为25KD的PlnC和PlnD蛋白。纯化得到的PlnC和PlnD蛋白为研究调节因子(RR)在QS中的作用模式以及生物调控细菌素合成机制奠定了基础。