酪氨酸激酶家族所介导的信号转导通路在哺乳动物的个体发育、组织器官形成、代谢以及免疫等多个过程中发挥着重要的调节作用。该激酶家族共有约90个成员，根据其结构特点可分为受体型酪氨酸激酶亚家族和非受体型酪氨酸激酶亚家族。近年来的研究表明，白血病、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤的发生均与酪氨酸激酶活性的高度激活有关。因此，利用化学小分子抑制剂或单克隆抗体技术来有效关闭特定酪氨酸激酶的活性以阻断下游信号的传导，从而抑制肿瘤的生长和迁移，成为抗肿瘤治疗研究的重要方向。作为受体型酪氨酸激酶亚家族的一个新成员，NOK/STYK1（Novel oncogene with Kinasedomain或serine/threonine and tyrosine receptor protein kinase）也被鉴定为原癌基因，并且在多种恶性肿瘤组织中，如乳腺癌、肺癌、卵巢癌等，均能检测到NOK/STYK1的高表达。因此，NOK很可能可以作为恶性肿瘤早期诊断的一个标志。然而，对于研究NOK/STYK1在信号转导通路中所发挥的功能及其活性调节机理，却缺乏相应的单克隆抗体。在本研究中，我们利用真核昆虫表达系统表达并纯化人NOK/STYK1的抗原（AAIKTADDEA），免疫Balb/C小鼠后，取免疫反应最好的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。应用有限稀释法对融合后的细胞进行筛选，并获得能稳定分泌抗NOK/STYK1的单克隆杂交瘤细胞株7G9。该细胞株经过扩大培养后，通过小鼠腹水制备纯化出NOK/STYK1的单克隆抗体。Western blotting和ELISA检测结果显示，纯化出的单克隆抗体能够特异性识别NOK/STYK1且效价较高。另外，通过免疫荧光标记和免疫组化分析显示，该单克隆抗体也能够有效检测到多种肿瘤细胞内及恶性肿瘤样本中高表达的NOK/STYK1。本研究首次制备了人的NOK/STYK1的单克隆抗体，为深入探索NOK/STYK1在肿瘤发生中的调节机理提供了帮助，也为通过利用单克隆抗体技术来阻断NOK/STYK1介导的信号转导通路进行抗肿瘤治疗提供了新的方向。