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目的:探讨FKN/CX3CR1信号轴对内皮细胞炎症反应的影响,为动脉粥样硬化炎症反应的分子机制研究奠定基础。方法:1)选取EA.HY926细胞株为实验对象。用完全培养基(M199:胎牛血清:青链霉素=100:10:1)培养细胞。选择不同浓度(0、12.5、25、50、100、200ng/mL)FKN分别处理细胞24h。qRT-PCR检测细胞中CX3CR1mRNA表达,Western-blotting检测细胞中CX3CR1蛋白表达,据此确定最适表达浓度;2)FKN(25ng/mL)处理EA.HY926细胞株(0、2、4、8、12、16、24、48h)。分别用qRT-PCR和Western blotting在mRNA和蛋白水平检测细胞中CX3CR1的表达情况,进而确定最佳表达时间;3)慢病毒包装的CX3CR1-RNAi转染内皮细胞,用qRT-PCR和Western blotting分别在mRNA和蛋白水平检测细胞中CX3CR1的表达情况,确定干扰情况;4)选择FKN(25ng/mL)作用于CX3CR1-RNAi(56338-1)转染的内皮细胞8h后,ELISA检测培养细胞的上清中IL-6和TNF-α含量,确定CX3CR1在FKN诱导的内皮细胞炎症反应中的作用。结果:1)25ng/mL FKN刺激内皮细胞24h时,CX3CR1蛋白水平表达增加;2)FKN(25ng/mL)刺激内皮细胞不同时间,qRT-PCR检测显示在FKN刺激细胞8h后,CX3CR1mRNA水平表达增加,Western-blotting检测显示在FKN刺激24h后,蛋白水平表达增加;3)CX3CR1-RNAi转染的内皮细胞72h,qRT-PCR和Western-blotting检测显示用CX3CR1-RNAi(56338-1)转染的内皮细胞,CX3CR1mRNA和蛋白表达减少;4)FKN(25ng/mL)刺激EA.HY926内皮细胞8h后,内皮细胞分泌IL-6(1.3倍,P<0.05)和TNF-α炎症因子(1.08倍);5)FKN(25ng/mL)刺激CX3CR1干扰的人脐静脉内皮细胞8h后,炎症因子IL-6(3.53倍,P<0.05)和TNF-α(1.25倍,P<0.05)分泌增加。结论:外源性FKN可以促进内皮细胞合成并分泌IL-6和TNF-α,促进内皮细胞炎症反应的发展,但是在FKN诱导内皮细胞炎症反应过程中,CX3CR1的作用有待于更深入的研究。