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鸭病毒性肝炎(Duck Viral Hepatitis,DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus)引起的以侵害雏鸭为主的高死亡率的烈性传染病。该病毒可分为3个血清型,即DHV-I、DHV-II和DHV-III。这3个血清型之间无血清学交叉反应,三个血清型中DHV-I分布最为广泛,分为A、B和C3个基因型,主要发生于3周龄以下雏鸭的传播迅速、致死率高。II型和III型DHV只在英国和美国有过相关报道,但致死率较低。我国感染的鸭肝炎主要是由DHV-I引起,1周龄的雏鸭感染最为严重,感染后的后死亡率几乎高达为100%,目前已成为危害中国养鸭业最为严重的疫病之一。DHV-I在世界范围内流行和分布,是严重危害养鸭业的重要病原,造成了巨大的经济损失。本研究对2株冻存的抗DHV-I VP1蛋白的阳性杂交瘤细胞2D9、2D10分别进行了复苏,并分别进行了扩大培养,最后将扩大培养的阳性杂交瘤细胞腹腔注入6周龄的Balb/c小鼠,大约每只注射2×106个细胞,使其在小鼠腹腔内诱生大量腹水。收集腹水后,使用抗体亚类鉴定试剂盒对所获单抗进行鉴定,结果显示其单抗亚类均为IgG1,轻链为κ链。接着将获得的两株单克隆抗体2D9、2D10纯化,最后得到准度较高的纯化产物,利用噬菌体展示随机12肽库对其进行生物淘选。分别经过3轮淘洗和亲和筛选,将最终产物纯化,送去测序,最后对测得到的有效序列进行比对分析,并分别相应获得8个阳性噬菌体克隆,经DNA测序分析,推导和比对,最后分别获得阳性噬菌体所展示的共有氨基酸序列分别为:173LPAPTS178和184RSND187。通过人工合成目的肽段,通过竞争抑制试验、亲和试验和ELISA检测,证明所合成的多肽能抑制单抗和VP1蛋白的结合,确认序列173LPAPTS178和184RSND187为I型鸭肝炎病毒VP1蛋白的两个抗原表位。本研究成功纯化了2株纯度较高的单克隆抗体2D9、2D10,利用噬菌体展示技术成功的鉴定了两株单克隆抗体2D9、2D10的抗原表位,本研究掌握了抗原鉴定纯化技术、噬菌体展示技术,为进一步探讨VP1蛋白在I型鸭肝炎病毒中的结构和功能提供了便利的研究手段,为寻找治疗I型鸭肝炎病的药物作用靶点的研究提供了重要参考材料,进而在预防和控制I型鸭肝炎病上具有重要的理论意义。