拟南芥一氧化氮突变体sno1的筛选及基因的图位克隆

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NO是一种气体活性小分子,它的化学结构简单,但它在生物体内有很重要的作用。现在国际上有关NO的研究正方兴未艾,有关NO研究的文献大量涌现。近年来,虽然有关NO在植物中分子功能的研究取得了较大进展,但有关NO作用的分子机理的研究还远远不够深入,特别是有关NO在基因和分子水平上的研究。我们用模式生物拟南芥通过正向遗传学筛选拟南芥突变体,得到多株NO相关突变体。snol(sensitive to NO1)就是其中的一株突变体,在正常情况下突变体的根比野生型的稍短,不明显,但是当用50uM浓度SNP处理时,与野生型相比突变体snol根的生长明显受到抑制,表现出对NO很敏感。另外,通过生理生化实验分析我们发现snol对KCl也很敏感。通过ICP-MS仪测定不同浓度SNP处理下突变体snol和野生型中各种元素含量的变化,同时测定了内源NO含量高的突变体noxl和内源NO含量低的突变体Atnoal中各种元素含量变化,发现外施NO使野生型和突变体snol中钾元素的含量降低,并且snol中钾元素的含量比野生型中的更低,另外内源NO含量高的突变体noxl在正常情况下钾元素的含量就比野生型中低。其原因可能是该突变基因影响拟南芥中钾元素的平衡,从而影响拟南芥根的生长。此外,通过遗传分析证明该突变体是单基因隐性突变。利用图位克隆技术,已将突变基因定位于拟南芥第二条染色体的Marker N和Marker P之间,有20kb的距离,包含五个基因,正在进行测序。
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