实验从邯郸含油土壤中采集样品，经过初筛，分离出多株产脂肪酶的菌株，再进行复筛，其中5株酶活较高，测定其最适反应温度和0℃的酶活，选出1株菌株，最适反应温度为30℃，且0℃时的酶活最高，确定该菌株产低温脂肪酶，并命名为HEBUST LIP-L。再对该菌株进行形态学和部分生理生化特征分析，将HEBUST LIP-L初步鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.)。对可能影响Pseudomonas sp. HEBUST LIP-L产酶的7个因素即糊精、蛋白胨、KCl、橄榄油、Tween80、初始pH及接种量进行全面考察，选用Plackett-Burman、最陡爬坡实验与响应面法相结合的实验统计方法，快速而有效地筛选出3个主效因子（蛋白胨、橄榄油、Tween80），进而得到产脂肪酶的最佳组合：蛋白胨26.4g/L、橄榄油16.95mL/L、Tween8025.6mL/L、糊精7.5g/L、KCl3mmol/L、pH7.0、接种量8%，脂肪酶的产量达到46.08U/mL，比优化前提高98%。该模型能很好的预测发酵情况，科学指导酶生产。将Pseudomonas sp. HEBUST LIP-L所产粗酶液依次进行双水相萃取体系（PEG2000浓度为15.0%，K2HPO4浓度为20.0%，pH值为7.0）、DEAE-纤维素离子交换层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析实验，分离纯化出达到电泳纯的脂肪酶，并测定出该脂肪酶的相对分子量为35kDa，最适反应pH值为9.5，最适反应温度为30℃，在此两种条件下，该酶相对酶活最大，且在0℃可达到最大酶活的70%，确定该酶为低温脂肪酶，该酶在pH4.0-10.5之间具有稳定性，对pH适应范围广，且对热较稳定。