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PTPN22是一种非受体型蛋白酪氨酸激酶，主要表达于造血细胞和免疫细胞中，作用于配体蛋白的酪氨酸去磷酸化过程。PTPN22基因1858位点C至T的单核苷酸突变引起人体中第620位和小鼠中第619位编码氨基酸精氨酸(Arg)至色氨酸(Trp)的变异而这一多态性被证实与许多自身免疫性疾病相关，如Ⅰ型糖尿病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮和克罗恩病等。在T细胞中，PTPN22 Arg＞Trp多态性导致与下游配体基因，蛋白络氨酸激酶Csk的结合程度降低进三倍，进而影响T细胞受体信号通路。然而这一Arg到Trp的变异对于免疫细胞的形态、功能及糖尿病发生的影响还知之甚少。本研究以自主构建的PTPN22619Arg＞Trp基因敲入小鼠为实验对象，研究了这一变异对小鼠Ⅰ型及Ⅱ型糖尿病发生的影响及抗原呈递巨噬细胞、Treg、 Teff等免疫细胞的数目、形态及功能的变化，并通过细胞分泌因子、标志性蛋白和表面抗原的检测进行了具体的机理研究。本结果将对深入研究糖尿病、自身免疫疾病的发病机理提供重要的理论基础。 研究结果主要有: 1.巨噬细胞分化后形态受PTPN22619Arg＞Trp多态性影响。 (1)在BL6背景的PTPN22619Arg与Trp敲入鼠中，Trp敲入鼠的脾脏增大，但各种免疫细胞含量并没有变化。 (2)巨噬细胞在细胞因子的作用下分化为球形M1巨噬细胞，去分化后619Arg巨噬细胞重新恢复梭形而619Trp还是基本保持球形。(3)作为PTPN22配体，在细胞骨架重新构架中具有重要作用的VAV的去磷酸化程度在619Trp小鼠中减弱。 2.PTPN22619Arg＞Trp多态性影响巨噬细胞功能及分泌因子表达量。 (1)619Trp巨噬细胞比野生型巨噬细胞更能促进T细胞活性和增殖。(2)619Trp巨噬细胞具有更强的吞噬能力。(3)619Trp巨噬细胞表面表达更多的MHCⅡ，CD80和CD86。 3.巨噬细胞功能及分泌因子表达量变化不足以诱发突变敲入鼠发生Ⅱ型糖尿病。 (1)619TrpM1巨噬细胞抑制细胞因子，如IL-6，iNOS与TNFa的表达。 (2)与PTPN22619Trp巨噬细胞共培养的成熟脂肪细胞表达更多的GLUT1。 (3)高脂日粮饲喂下，BL6背景的PTPN22619Arg与Trp敲入鼠的体重，葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性无显著差异。 4.与人类发病相反，NOD小鼠中PTPN22619Trp对Ⅰ型糖尿病发生具有保护作用，其原因可能是由于PTPN22619Arg＞Trp多态性对于Treg的影响不同。 (1)NOD背景的PTPN22619Trp小鼠对自身免疫性疾病的抵抗力升高。 (2)Trp敲入鼠的Treg细胞数目增多但是对Teff细胞增殖的抑制功能较野生型小鼠减弱，且Trp敲入鼠的Teff细胞具有更高的增殖能力。(3)在体实验证明，在等量Treg注射的前提下，619Treg小鼠患糖尿病的几率大大增加，这与人体中的发现相同。综上所述，PTPN22619Arg＞Trp多态性可影响巨噬细胞的形态与功能，并进而影响T细胞的活性与增殖，从而引发一系列自身免疫性疾病。虽然突变的巨噬细胞由于分泌不同的细胞因子影响了脂肪细胞GLUT1的表达，但在体情况下并不引起体重、胰岛素敏感性等的变化。而PTPN22619Arg＞Trp多态性导致的Treg细胞数量与功能的变化可能是另一其引发自身免疫性疾病的原因。本研究揭示了PTPN22619Arg＞Trp多态性对于Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病发生的影响以及对于免疫系统内多种免疫细胞的作用，为糖尿病的发病机理研究提供了重要的参考意义。