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人腺病毒被广泛地作为基因转移载体用于人类基因治疗或制备成重组病毒疫苗。但人腺病毒有两个主要缺点，首先是大多数人曾经感染过腺病毒，体内存在针对该病毒的免疫应答，这导致转入的基因因已存在的免疫反应而被逐渐清除，使得导入基因表达持续时间短。其次，即使只带有极少人腺病毒包装信号和反转重复序列的人腺病毒载体也有和野生人腺病毒共复制的可能性，这就影响到其作为载体使用的安全性。这一切均限制了人腺病毒载体的应用。动物腺病毒能转染人细胞，具备将外源基因转移到人细胞内的能力，人群中也不存在针对它们的免疫应答，因此，开发动物腺病毒以代替人腺病毒作为基因转移载体是一个很好的尝试，至少它们能成为重组疫苗载体在各自种群中作出贡献。已经构建成功的重组动物腺病毒有重组牛腺病毒3型，猪腺病毒3型，羊腺病毒和犬腺病毒2型。现在我们又发展了一个新的极具重组疫苗和基因转移载体潜力的动物腺病毒——犬腺病毒1型疫苗株(Cannaught Laboratory Limited，CLL)。 在本室已构建克隆有CLL DNA右末端59-100mu的质粒p8基础上，我们对CLL DNA的E3区，pVⅢ基因和部分fiber基因进行序列测定和分析。E3区大小为811bp，有3个重叠开放阅读框，其上游启动子结构与人和其它腺病毒相似。根据CLL E3区序列测定和分析的结果，利用CLL上酶切位点，经过多步亚克隆构建成E3缺失质粒p10。该质粒缺失了E3区660bp BalⅠ+ApaⅠ片段并引入33bp具有多克隆酶切位点PmeⅠ，NotⅠ和BclⅠ的接头。经过限制性内