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稀土配合物荧光探针具有发射峰尖锐、Stokes位移大、荧光寿命长等特点,结合时间分辨荧光分析技术,展现出高灵敏度、高选择性的优势,在生物临床分析、病理学等方面得到了广泛应用。作为体内重要的第二信号传导分子,一氧化氮(NO)对生物体的各种生理活动都有巨大的影响。体内NO含量的异常会引发癌症、帕金森氏综合征、高血压等疾病,因此,建立高灵敏度、快速检测NO的方法十分重要。在本论文的研究中,通过引入邻二氨基苯基作为NO的识别基团,设计合成了两种?-二酮类铕(Ⅲ)配合物时间分辨荧光探针,建立了体外、活细胞内及活体内NO的时间分辨荧光检测方法。具体内容分为以下两部分:1、新型一氧化氮特异性识别铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及应用首先设计合成了一种含NO特异性捕获基团—邻二氨基苯基的联三吡啶衍生物配体4-(4-[2,2’:6’,2”]三联吡啶-4’-基-苯氧基)-苯-1,2-二胺(DAPT),然后与?-二酮配体(DHH)和铕(Ⅲ)离子共配位合成出一种新型铕(Ⅲ)配合物时间分辨荧光探针[Eu(DHH)3(DAPT)]。该探针的自身荧光较弱,与NO反应后荧光强度可升高近9倍,显示出较高的NO检测灵敏度。其它活性物种的干扰实验表明,该探针对NO的选择性较好。利用该探针成功进行了溶液体系中NO的时间分辨荧光测定及活细胞内和斑马鱼体内NO的时间分辨荧光成像测定。2、一氧化氮特异性识别长波长激发铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及应用在探针[Eu(DHH)3(DAPT)]的研究基础上,将配合物中的DHH配体用具有长波长吸收性质的?-二酮配体4,4,5,5,5-五氟-1-(菲-3-基)-1,3-戊二酮(pfppd)代替,合成出一种长波长激发的铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(pfppd)3(DAPT)]。与探针[Eu(DHH)3(DAPT)]相比,探针[Eu(pfppd)3(DAPT)]的最大激发波长红移了15 nm(?ex=350 nm),值得注意的是探针在380 nm处的激发强度达到最大激发强度的74.3%,实现了长波长激发,而且稳定性更好。利用该探针成功对活细胞内NO进行了时间分辨荧光成像测定。