目的:建立蒙成药三臣丸体外HPLC-DAD指纹图谱,并应用一测多评(quantitative analysis of multicomponents by single marker,QAMS)技术同时测定紫丁香苷,羟基红花黄色素A,芦丁,山奈酚-3-O-芸香糖苷,脱水红花黄色素B,胆酸,猪去氧胆酸等7种成分的含量,采取体外指纹图谱结合一测多评技术的质量评价模式,旨在为蒙成药三臣丸体外质量控制方法提供比较全面的科学依据;基于中药血清药物化学理论,应用于蒙成药三臣丸复方当中,建立三臣丸含药血清HPLC-DAD指纹图谱,分析给药后吸收入血的成分,对蒙成药三臣丸的血清药物化学进行初步研究。方法:(1)以羟基红花黄色素A色谱峰为参照峰,对10批三臣丸样品进行分析,建立蒙成药三臣丸HPLC-DAD体外指纹图谱共有模式,进行相似度分析,并与混合对照品溶液对比指认共有峰。(2)以羟基红花黄色素A为内参物,建立其他6种成分的相对校正因子(relative correction factor,RCFs),用相对校正因子和外标法分别计算含量;同时在3种不同类型的C18色谱柱及3台不同品牌的色谱仪器上考察相对校正因子的重现性。(3)制备5批三臣丸混悬液,并灌胃(ig)给予Wistar大鼠,制备含药血清,与空白血清样品对比建立蒙成药三臣丸含药血清HPLC-DAD指纹图谱共有模式,进行相似度分析,并与混合对照品溶液对比指认入血成分。(4)在获得体内外三臣丸指纹图谱的基础上,结合三臣丸全方、缺味药组、单味药组含药血清样品色谱图进行对比,对三臣丸复方中吸收入血成分及其来源进行初步解析和说明。结果:(1)应用HPLC-DAD法测定了10批三臣丸样品指纹图谱,建立了蒙成药三臣丸特征指纹图谱评价模式,标定了其中36个共有峰,经与对照品比较指认了7个共有峰,其中4号峰为紫丁香苷,5号峰羟基红花黄色素A,15号峰为芦丁,16号峰为山奈酚-3-O-芸香糖苷,18号峰为脱水红花黄色素B,24号峰为胆酸,26号峰为猪去氧胆酸;将10批三臣丸样品与对照图谱进行比对,相似度结果均在0.99以上。(2)在体外指纹图谱基础上建立了一测多评法测定蒙成药三臣丸中7种成分含量的方法,应用相对校正因子与外标法计算10批三臣丸样品中7种成分的含量,以相对误差评价两种方法,结果显示无显著性差异;相对校正因子在不同类型C18反相色谱柱及不同品牌色谱仪器上的重现性良好;选择“两点校正法”与相对保留时间法相结合的形式对7个待测色谱峰进行定位。(3)建立了蒙成药三臣丸含药血清HPLC-DAD指纹图谱,测定5批三臣丸含药血清样品,相似度在0.90以上,并指认了其中6个共有峰,其中2号峰为紫丁香苷,3号峰为羟基红花黄色素A,10号峰为山奈酚-3-O-芸香糖苷,12号峰为脱水红花黄色素B,24号峰为胆酸,25号峰为猪去氧胆酸。(4)三臣丸混悬液灌胃后吸收入血的成分有30个,其中直接以原型被吸收入血的有24个,其余有可能为代谢后新产生的药源性成分或通过药物刺激产生的血液内源性成分;并对各个色谱峰的来源和归属进行了初步解析和说明。结论:(1)本研究建立了蒙成药三臣丸的HPLC-DAD指纹图谱评价体系,所得对照图谱与10批三臣丸样品指纹图谱基本类似,为完善三臣丸的质量控制提供了新的科学依据。(2)本研究所建立的QAMS法可以作为一种简便准确的质量评价模式用于三臣丸中多种成分的定量测定,为蒙成药三臣丸的质量标准提供新的科学依据。(3)本研究建立了三臣丸含药血清HPLC-DAD指纹图谱评价体系,所得对照图谱与5批三臣丸灌胃所得指纹图谱基本类似,反映了三臣丸口服给药后的成分吸收入血情况,为三臣丸的药效物质基础研究提供科学依据。(4)本研究中蒙成药三臣丸吸收入血的成分有30个,其中人工牛黄贡献3个;其余成分均由红花以直接或者间接的方式贡献,其中15个成分为单味红花贡献,9个成分是在红花与人工牛黄配伍的情况下提供的,1个成分是在红花与天竺黄配伍的情况下提供的,另外2个是在三臣丸全方配伍的条件下提供的成分。