君子兰组织培养技术研究

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君子兰是石蒜科君子兰属的多年生草本植物,具有很高的观赏价值和经济价值。本研究以健康成株的君子兰为外植体,采用单因素和正交试验设计获得君子兰无菌材料,筛选出愈伤组织,丛生芽增殖及诱导生根的各阶段的最适培养基;研究结果如下:1、以君子兰叶片为外植体,考察70%的乙醇对外植体的最佳杀菌时间,并且分别利用0.1%的升汞和4%的次氯酸钠对君子兰外植体进行杀菌,从而找出君子兰外植体最佳消毒方法。结果表明70%乙醇处理40s后,次氯酸钠处理20min为最佳消毒方案。2、采用单因素实验对诱导愈伤组织的培养基类型进行探讨。结果表明MS培养基是较适合君子兰外植体愈伤组织诱导的基本培养基;采用正交试验对影响愈伤组织诱导率的因素进行考察,结果表明NAA和2,4-D对君子兰愈伤组织的诱导率影响最大,6-BA对君子兰愈伤组织的诱导率影响最小。影响君子兰愈伤组织诱导率的主次因素依次为:C (NAA)>A (2,4-D)>D(蔗糖)>B(6-BA)。君子兰诱导愈伤组织的最佳方案是:A2B3C2D2,即2,4-D浓度1.0mg/L,6-BA浓度为2.0mg/L, NAA浓度为1.0 mg/L,蔗糖含量为30g/L。3、采用单因素分别对君子兰不定芽增殖培养基的种类,生长素和细胞分裂素的浓度进行探讨。研究表明最适培养基为MS,其中NAA浓度1.5 mg/L,细胞分裂素6-BA浓度1.0 mg/L为君子兰丛生芽增殖的最佳浓度。4、君子兰不定芽诱导生根的研究表明,培养基的种类对生根培养的影响效果最大,蔗糖浓度对生根的影响效果最小,影响生根的主次因素依次为:A(培养基种类)>C(pH)>D(NAA)>E(KT)>F(6-BA)>B(蔗糖浓度);最佳的诱导生根方案是:A2B4C2D4E1F1,即培养基种类为1/2MS,蔗糖浓度为35g/L,pH为6.5,NAA浓度为1.5 mg/L,KT浓度为0.1 mg/L,6-BA浓度为0.1 mg/L。
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