榼藤子Entadae Semen系豆科榼藤属植物榼藤Entada phaseoloides(Linn.)Merr.的干燥成熟的种子,具有除风止痛、补气补血、强筋硬骨的功效,主要用于治疗四肢无力、水血不足等症。现代研究表明榼藤子还具有抗炎、抗癌、降血糖、镇痛等其它多种药理活性。但是,关于榼藤子质量标准研究仅有相关理化鉴别报道,2010年版《中国药典》只有药材性状描述和醇溶性浸出物的测定,薄层色谱鉴别也只以对照药材为对照,缺乏专属性强、能反应其功能主治的质量控制指标,质量标准有待完善。为了保证榼藤子的安全性及有效性,本课题确定了榼藤子的化学对照品,研究了化学对照品的制备工艺,建立了完善的药材质量控制方法,起草了榼藤子的质量标准草案,为榼藤子的质量控制提供了依据。本课题首先对榼藤子的化学对照品进行了研究。榼藤子苷(Phaseoloidin)及榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷(Entadamide A-β-D-glucopyranoside)为榼藤子的主要成分,含量较高,专属性强。经药理实验发现榼藤子醇提物和单体化合物均具有显著的补气补血活性,能显著改善由联合注射环磷酰胺(CTX)和乙酰苯肼(APH)所致小鼠血虚模型的各项血虚指数水平,以及由饥饿法所致气虚模型小鼠的各项气虚指数水平。此外,本实验室前期工作表明榼藤子苷及榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷还具有镇痛、抗炎和促进胃肠动力活性,与其传统功效相一致,符合对照品的要求,能够客观评价榼藤子药材的真伪与质量。因此,确定榼藤子苷和榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷为榼藤子的化学对照品,并对其制备工艺进行了考察,包括不同提取溶剂、浸润时间以及提取方法对提取结果的影响,并根据单因素考察的结果设计了乙醇回流提取的正交试验从而确定了最佳提取条件;考察了不同上样量、硅胶粒度、洗脱剂成分、流速、径高比对纯化结果的影响,确定了最佳纯化工艺。最后通过紫外光谱、红外光谱、质谱及核磁共振对其结构进行确认。在此基础上,本文从鉴别、检查、含量测定等方面对榼藤子的质量标准进行系统的研究,制定了合理的限度,首次拟定了榼藤子的质量标准草案。首先从性状鉴定和薄层色谱鉴别这两个方面对榼藤子的鉴别进行研究。经对21批样品进行分析,发现所建立的性状鉴别方法具有较好的重现性。以榼藤子苷及榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷为对照,建立了榼藤子的TLC鉴别方法,供试品溶液在与对照品相应的位置,均显现相同颜色斑点,表明该方法具有良好的专属性。然后,本文依照2010版药典对21批榼藤子样品进行了水分和总灰分的测定。根据测定结果,拟定其水分不得过9.0%、总灰分不得过3.0%。使用冷浸法测定了21批样品的醇溶性浸出物,根据结果,拟定榼藤子中醇浸出物不得低于29%。最后建立了榼藤子中榼藤子苷和榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷的HPLC含量测定的方法,该方法具有简便、快速、灵敏、准确等优点。采用该方法测定了21批榼藤子样品中榼藤子苷和榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量,测定结果表明,榼藤子苷质量分数范围为5.12%~9.24%,榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷的质量分数范围为0.55%~2.17%,因此依据所得数据拟定:用干燥品计算,榼藤子苷的含量不得少于4.0%,榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量不得少于0.6%。