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喉气管狭窄是临床上较为常见的疾病,狭窄导致通气障碍、呼吸困难、患者需行气管切开、严重影响患者的社会交往及生存质量,给患者带来极大的身心痛苦。气管粘膜受损、坏死、缺损是造成气管狭窄的主要原因之一。因此,气管粘膜缺损及时有效的修复是预防及治疗气管狭窄的重要手段。目前,气管粘膜缺损的主要修复方法有鼻中隔粘膜、鼻窦粘膜、口腔粘膜等自体皮片的移植和转粘膜瓣等。但是,自体皮片或粘膜瓣存在来源有限、取材时增加患者痛苦等问题。随着组织生物工程的发展,异种去细胞真皮基质作为一种生物修复材料,来源广泛、使用简便,已成功应用于口腔黏膜修复、声带重建、腹壁修补等领域[1-3]。本实验应用ADM对气管粘膜大面积缺损的实验犬进行修补,观察实验犬气管粘膜生长修复情况,希望能为临床上气管粘膜大面积损伤患者提供一种新的有效的修复方法。目的1.通过王智的建模方法[4],切开第2到第6气管环,完整剥离20mm×25mm的气管前壁粘膜,验证20mm×25mm的气管粘膜缺损可以引起实验犬的气管狭窄。2.通过使用ADM修复气管粘膜缺损,明确ADM是否可以诱导气管粘膜的修复,是否可以防止气管瘢痕性狭窄的形成,为下一步临床上修复大面积气管粘膜损伤、防止气管瘢痕狭窄形成提供理论和实验基础。方法1.建立犬气管粘膜缺损模型本实验通过王智的建模方法,用10只犬于气管前壁正中线偏右15mm处纵行切开第2至第6气管环,在距离气管切口8mm外完整剥离面积为20mm×25mm的气管前壁全层粘膜,底部的气管软骨膜保留完整,制造20mm×25mm气管全层粘膜缺损动物模型。2. ADM在防止气管瘢痕狭窄中的作用将10只实验动物随机分为2组:实验组(5只)将20mm×25mm的脱细胞真皮基质材料覆盖缝合于20mm×25mm的创面上;对照组(5只)将20mm×25mm的创面做旷置处理。分别于术后2、4、6、8、10周定期进行一般观察、喉镜观察、大体观察、最大瘢痕厚度观察、HE染色观察、Masson染色观察及电镜观察。结果1.建立犬气管粘膜缺损模型10只实验动物均能良好的耐受建模的手术操作。5只对照组动物随着时间延长组织学检查和电镜检查可观察到不同程度的疤痕修复,8周时喉镜可观察到气管明显畸形。2. ADM在防止气管瘢痕狭窄中的作用所有实验动物均存活至预期时间终点。HE结果发现采用异种去细胞真皮基质修复创面的实验组动物,2周时基质真皮内已有细胞长入,4周时基质表面已有排列整齐的柱状上皮细胞覆盖。Masson染色发现实验组4周时已有红染血管壁结构。电镜也观察到实验组4周时创面表面有纤毛覆盖。喉镜观察实验组动物在10周时管腔形态和大小均无明显变化。结论1实验证明20mm×25mm的气管前壁粘膜全层切除可以引起犬的气管瘢痕狭窄。2利用ADM对气管粘膜缺损进行修补后,ADM可以较好地诱导组织细胞的生长修复,抑制瘢痕生长,防止气管瘢痕狭窄的形成。ADM来源广泛,修补方法简便易行,为临床上治疗大面积气管粘膜损伤、防止气管瘢痕狭窄形成提供新的治疗思路。