目的:据报道,每年因烧伤和慢性伤口而受到影响的人分别超过1100万人和650万人。大面积的皮肤创伤或烧伤在治疗后通常会留下疤痕。在过去的几十年中传统的伤口愈合敷料主要致力于抵抗感染和炎症,递送生物活性物质以促进修复,但这些敷料通常可以加速皮肤的愈合,但却很少能促进皮肤附属器的再生。而细胞疗法虽疗效较佳,但其涉及到细胞的分离和培养,时间和物质成本均较高。羊膜构成了预先形成的干细胞膜片,含有丰富的干细胞资源,但其柔软且较薄,难以附着在伤口床上。因此本课题组研发出一种大鲵皮肤分泌物（SSAD）的水凝胶作为微粒羊膜（约600μm）的支架材料,以促进皮肤大面积缺损的无瘢痕愈合并探究其促进无瘢痕愈合的可能机制。方法:为了获得SSAD粉末及微粒羊膜（约600μm）,对羊膜及大鲵的皮肤分泌物进行处理。制备完成的SSAD粉末与PBS混匀后可形成具有粘结性的SSAD水凝胶。采用扫描电镜观察SSAD水凝胶与微粒羊膜的粘结界面。在体外通过微粒羊膜的活死细胞染色及TUNEL染色检测SSAD水凝胶对微粒羊膜的毒副作用。通过羊膜间充质干细胞和Ha Cat细胞的细胞增殖实验,划痕和transwell实验验证SSAD水凝胶促进细胞增殖和迁移的效果。在大鼠背部做直径为20 mm的全层皮肤缺损模型,微粒羊膜,SSAD水凝胶作为阳性对照组,单纯伤口愈合作为阴性对照组,评估SSAD水凝胶荷载微粒羊膜促进大鼠皮肤无瘢痕愈合的效果。同时检测SSAD水凝胶荷载微粒羊膜对实验动物是否有毒副作用。最后,通过对经SSAD条件培养基培养的Ha Cat细胞及4组实验动物进行转录组测序,分析SSAD水凝胶荷载微粒羊膜的可能机制。结果:SSAD水凝胶与微粒羊膜结合后形成了良好的粘附界面。SSAD水凝胶具有良好的生物相容性,对比对照组,体外微粒羊膜的活死细胞染色及TUNEL实验均表现出较少的凋亡。细胞增殖,划痕和transwell实验表明SSAD水凝胶对羊膜间充质干细胞和Ha Cat细胞有促进增殖和迁移的作用。此外,在大鼠全层皮肤缺损模型的结果中显示,SSAD水凝胶荷载微粒羊膜组的伤口愈合时间最短且再生组织可以实现皮肤无瘢痕愈合,有皮肤附属器的再生。同时,毒副检测表明各实验组大鼠没有脏器的损伤和坏死。转录组分析表明,SSAD可以促进细胞的迁移、分化和增殖,这些功能可能归因于SSAD中丰富的生长因子。结论:来源于大鲵皮肤粘液的水凝胶具有良好的粘结性及生物相容性,可以作为支架材料荷载微粒羊膜促进皮肤的无瘢痕愈合,同时它促进细胞迁移、分化和增殖的潜力显示出它具有广泛的医学应用价值。