论文部分内容阅读
研究背景： 卒中(Stroke)是世界范围内危害人类生命健康的重要疾病，是60以上老年人的第二大死因，也是造成慢性残疾、老年痴呆的主要因素，给个人和社会都带来沉重的负担。其中缺血性卒中(Ischemic Stroke，IS)占80％以上。随着生活水平的不断提高，我国卒中的发病率呈上升趋势，并且北方高于南方。大动脉粥样硬化、小血管闭塞是缺血性卒中的常见病因，并且非常适合采用分子遗传学方法进行研究。 研究已证实，卒中不仅与传统因素如高血压、糖尿病、吸烟、饮酒、血脂异常以及肥胖等有关，还具有遗传易感性。内皮素系统基因在体内广泛表达，参与多种体内稳态平衡，并且与已知的缺血性卒中危险相关通路如一氧化氮信号通路、肾素-血管紧张素系统等进行相互作用。我们推测内皮素系统基因变异可能是缺血性卒中重要的危险因素。国际上，Gormley等人认为内皮素系统基因多态性不是小血管病的危险因素，但是他们并没有研究内皮素基因多态性与大动脉疾病的相关性。国内有关于EDN-1基因Lys198Asn多态性与缺血性卒中相关的报道。在本研究中，我们选取内皮素系统EDN-1，其受体EDNRA、EDNRB以及前体转换酶ECE-1，采用病例-对照研究方法，分析了EDN-1(rs1800541、rs2070699、rs5370),EDNRA(rs1801708、rs5333、rs5335),EDNRB(rs3818416、rs5351)以及ECE-1(rs212528、rs213045)位点基因型和等位基因在缺血性卒中病例组-对照组、病例亚组-对照组以及性别亚组中的频率分布差异，从而探讨内皮素系统基因多态性与中国北方汉族人群缺血性卒中的相关性，为深入了解缺血性卒中的发病机制提供充足的理论依据。 研究方法： 采用病例-对照研究方法，病例组选取中国北方汉族缺血性脑卒中患者，共381例，其中男性236例，女性145例，年龄29-88岁间，彼此无亲缘关系;选取性别、年龄与IS组相匹配的健康个体366例作为对照，男性225例，女性141例;在此基础上将IS组按病因不同分为大动脉粥样硬化性脑梗死(Large-artery atherosclerosis，LAA)和小动脉闭塞组（Small-artery occlusion，SAO）。应用SnaPshot SNP分型技术检测EDN1基因(rs1800541、rs2070699、rs5370)、EDNRA基因(rs1801708、rs5333、rs5335)、EDNRB基因(rs3818416、rs5351)和ECE1基因(rs212528、rs213045)位点多态性，基因分型结果经过基因测序进一步确认。用拟合优度x2检验验证每个位点SNP基因型分布频率是否符合Hardy-Weinberg平衡。采用SPSS17.0统计软件x2检验各个位点基因型、等位基因型在对照组与IS组及各亚组中的频率分布差异、风险度分析，最后结合临床资料，对相关数据进行Logistic回归分析，以P＜0.05为检验水准，排除传统混杂因素的干扰。 研究结果： 1、对于所选基因的所有SNP位点，除了EDNRB基因的rs5351位点在对照群体中不符合Hardy-Weinberg平衡，未进行后续分析，其余位点基因型分布在对照人群中均符合H-W平衡，具有良好的人群代表性。 2、男性群体中，缺血性卒中组与LAA组中EDN1基因的rs5370位点T等位基因频率明显高于对照组(IS:P=0.023;LAA:P=0.041)。SAO组中EDN1基因rs2070699位点T等位基因频率明显高于对照组(P=0.046)。 3、女性群体中，缺血性卒中组和LAA组中EDNRA基因的rs1801708位点基因型分布与对照组有显著性差异（IS:P=0.039;LAA:P=0.004）。LAA组rs1801708位点的A等位基因频率明显高于对照组(P=0.019)。SAO组中EDN1基因的rs1800541的T等位基因频率明显高于对照组(P=0.044)，rs2070699基因型频率与对照组有显著性差异(P=0.025)。 4、男性群体中，EDN1基因rs2070699位点G等位基因携带者的发病危险度增加到1.78倍(P=0.009;OR=1.78;95％CI=1.15-2.75)，rs5370位点T等位基因携带者的发病危险度增加到1.49倍(P=0.048;OR=1.49;95％CI=1.00-2.21)。EDNRA基因rs5335位点突变纯合型CC发病危险度明显降低(P=0.016;OR=0.52;95％CI=0.31-0.88)。在女性群体中，EDNRA基因rs1801708位点中，突变纯合型AA发病危险度明显高于G基因携带者(P=0.019;OR=2.65;95％CI=1.18-6.00)。 5、ECE1基因rs213045TT/TG基因型与rs213045GG相比，缺血性卒中风险显著增加（P=0.029，校正OR=1.43，95％CI=1.04-1.99）。 结论： 1、EDN1基因rs5370位点的T等位基因和rs2070699位点的G等位基因可能是北方汉族男性人群IS发病的风险因素。 2、EDNRA基因rs1801708位点的A等位基因能够增加北方汉族女性人群IS的发病风险。 3、ECE1基因rs213045位点的T等位基因能够增加北方汉族人群IS的发病风险。