香菇是中国生产最多的食用菌种类。香菇不仅有药用价值,还营养丰富,味道极好。香菇的生长和子实体形成受生物、化学和物理等许多因素影响。病毒感染也也是影响香菇正常生长的主要因素之一。一些病毒感染香菇可引起严重的子实体异形症状,一些病毒感染则不造成任何畸形或代谢变化。生产上常见的异形香菇子实体是否由病毒侵染引起尚不明确。本文通过采集市场上出现的异形香菇,检测子实体中是否含有病毒,同时,通过人工培养及诱发香菇子实体,观察是否产生异形子实体,来探讨引起异形子实体的病因。首先,下载和比对 NCBI(National Centre for Biotechnology Information)上登录的香菇病毒的RdRP(RNA-dependent RNA Polymerase)基因的序列,设计4对引物,对异形香菇子实体的总RNA进行RT-PCR,仅一对引物能扩增到一段模糊的约400 bp的片段,对所获片段进行回收、转化、测序及BLAST比对,发现所获序列与人类的哺乳动物腺病毒C株系(Human Mastadenovirus C strain)有80%的同源性,未发现已报道的寄生香菇的病毒。其次,通过小RNA深度测序技术,检测不同类型的异形香菇子实体混合样中是否存在病毒。在检测总RNA合格的情况下送专业公司检测测序。测序结果表明,获得2435,4892 个原始 reads,共有2290,4100 个质量好的 reads,占 94.04%;长度 18-26 nt的sRNA片段数量为1000,1252个,mapped sRNA的数量是14,2360个片段,mapped sRNA仅占1.42%。分析数据表明,与西枞色卷蛾颗粒体病毒(Choristoneura occidentalis granulovirus)同源的片段占总的mapped RNA片段的17.41%,占总的sRNA片段的0.25%是最有可能来源于待测sRNA数据库的病毒。未发现与已报道的香菇病毒同源的mapped sRNA片段。第三,分离和纯化不同类型的异形香菇样品,比较菌丝生长速度。结果发现,不同样品的香菇菌丝体,在PDA培养基上生长速度不同,个别样品生长速度较快,在第9d菌落直径达到8.0 cm以上的只有4个样品,包括W4-2和W4-7(菌落直径8.18 cm),W5-1和W5-3(菌落直径8.5 cm);菌落直径不达到5 cm的有5个样品包括W1-3、W1-3、W2-5、W3-2、W3-8 和 W3-9;其他样品的菌落直径在 6.45-7.55cm 之间。生长速度快的样品属于菌盖顶呈锥形和菌盖边缘有缺刻的异形类型,生长速度慢的有5个样品,其中3个样品(W3-2、W3-8和W3-9)属于多头子实体的异形类型,1个样品(W1-3)菌盖顶呈锥形类型,1个样品(W2-5)属于菌盖边缘有缺刻类型,其他异形类型的样品生长速度中等快。诱发出菇的结果表明,W2-3样品产生的子实体最多,84.82g/袋,生物效率13.05%。W5-1样品产生的子实体是最少,只有1.32g/袋,生物效率0.2%。21个样品中12个样品产生子实体。除了样品W2-3、W5-1、W5-3外都产生了正常的形态,样品W6-1由于子实体不能正常伸出塑料袋,所以产生异常的子实体。由于采集的样品经人工培养后可产生正常的子实体,因此认为,产生异形子实体的原因可能和培养过程的物理因素有关,如人工培养的环境控制不好、温度偏高、湿度不稳定、培养料装袋过紧使子实体不能正常出菇等,这些因素都可能引起出菇异常。生产上要控制好人工培养的条件,找出易引起出菇异常的因子,减少异形出菇率,提高产量和生物效率。