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目的:肾性贫血(renal anemia,RA)是慢性肾脏病(CKD)最常见的并发症之一,可加速肾功能损伤、诱发心血管事件,明显降低患者的生活质量及预后。但目前对肾性贫血的发病和干预机制认识尚不完整,尤其缺乏理想的肾性贫血动物模型。本研究旨在从临床上分析CKD最常见的疾病IgA肾病患者发生肾性贫血的临床病理特征及相关因素;探索并建立稳定的肾性贫血动物模型,进而利用该模型的肾性贫血特性,应用药理特性为抗纤维化的尼达尼布观察其对肾性贫血的疗效,从而阐明肾性贫血发生的分子机制,为更好地治疗肾性贫血提供临床及实验研究依据。方法:1.纳入解放军总医院肾脏病科经肾脏穿刺病理活检确诊为IgA肾病并符合纳排标准的成年患者462名,根据血红蛋白水平分为贫血组和非贫血组。分析本组IgA肾病患者发生肾性贫血的临床病理特征及相关因素。2.探索并建立肾性贫血动物模型:腺嘌呤模型(分别给予小鼠50mg/kg.d、75 mg/kg.d的腺嘌吟灌胃,4周);马兜铃酸模型(予以小鼠3mg/kg.2d、3mg/kg.3d马兜铃酸腹腔注射,6周),观察血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)等变化;PAS染色观察肾脏组织损伤,Masson’s和天狼星红染色检测肾脏纤维化等病变,免疫组化和Western blot测定肾组织a-SMA水平。用定量PCR(qPCR)Western blot、免疫荧光测定肾组织EPO表达量及部位。3.干预机制研究的动物实验分为3组:对照组、模型组、尼达尼布组。观察用药后各组的Hb、HCT、肾功能的变化情况,各组血清及肾组织EPO表达变化;PAS染色观察各组肾脏病理改变、Masson’s和天狼星红染色检测肾脏纤维化,免疫组化测定组织α-SMA,westem blot测定FGFRI、ERK1/2及其磷酸化水平,同时检测TNFα蛋白表达情况。结果:1.IgA肾病的贫血类型以正细胞正色素为主,在CKD3期肾性贫血的患病率已达42.9%,CKD5期患者全部出现贫血。回归分析提示,IgA肾病贫血的相关因素是女性、低血清白蛋白、eGFR下降、重度肾间质纤维化/肾小管萎缩。2.动物模型实验结果显示,50mg/kg.d和75 mg/kg.d的腺嘌呤灌胃4周无法制备合格的肾性贫血动物模型。马兜铃酸3mg/kg.2d(AA/2d)和3mg/kg.3d(AA/3d)组小鼠用药6周后血肌酐分别为29.9±1.5umol/L、31.0±1.9umol/L,比对照组(8.7±1.4umol/L)均明显升高(P<0.01),在第9周和12周时与对照组相比仍明显升高;用药6周后AA/2d和AA/3d组的Hb分别为88.3±3.1 g/L、85.7±7.4 g/L,比对照组(148.7±4.9g/L)明显降低(P<0.001),至第9周和12周时,2组的Hb水平与对照组相比仍明显降低,提示肾性贫血造模成功。PAS染色及纤维化染色示AA/2d组、AA/3d组出现明显的肾间质纤维化。qPCR及Western blot结果显示,不同时间点检测AA/2d、AA/3d组的肾脏组织中的EPOmRNA和蛋白表达水平明显下降。免疫荧光结果显示EPO表达阳性部位在肾小管间质。而AA/2d组、AA/3d组间上述的肾脏病变、贫血和EPO无统计学意义。3.干预机制研究结果:尼达尼布可改善马兜铃酸诱导的小鼠的肾性贫血,尼达尼布组的血红蛋白(115.3±3.1g/l)较模型组(96.3±5.1g/l)明显改善(P<0.001),并可减轻肾间质纤维化。FGFR1及ERK1/2的磷酸化水平下降,TNFα的水平下降。结论:IgA肾病患者贫血患病率28.6%,其各阶段都需关注肾性贫血,因在CKD 3期时肾性贫血已达42.9%,CKD5期患者全部出现贫血。研究发现重度肾间质纤维化/肾小管萎缩是IgA肾病患者的肾性贫血发生和加重的影响因素。3mg/kg.3d的马兜铃酸连续给药6周可成功建立合格稳定的肾性贫血小鼠模型,该模型临床表现为慢性肾功能损伤和贫血,组织中的促红素表达下降;肾脏病理表现为不可逆的肾间质纤维化。应用抗纤维化药物尼达尼布干预实验,发现其可改善马兜铃酸诱导的肾性贫血,减轻肾脏间质纤维化,其作用机制可能与尼达尼布可以抑制FGFR1的磷酸化有关,证实肾间质纤维化是慢性肾脏病肾性贫血发生发展的重要机制之一。