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由于抗生素的滥用,导致具有很强耐药性的“超级细菌”层出不穷。作为一类超级细菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)已成为人畜共患的常见病原菌之一。本课题以滁菊精油(Chrysanthemum essential oil,CHEO)为抗菌剂,探究其对MRSA的抗菌机制及在生肉中的应用,为天然抗菌防腐剂的开发提供新思路。主要研究结果如下:(1)CHEO中的四种主要成分为龙脑(19.55%),β-芹子烯(16.25%)、二茨酮(13.48%)和左旋乙酸龙脑酯(8.22%)。利用倍数稀释法测定10种致病菌的MIC和MBC,结果显示CHEO具有广谱抗菌性能,且对MRSA的MIC和MBC分别是2.5 mg/mL和5 mg/mL。由DPPH·自由基实验可知,CHEO对自由基清除率可达52.42%。同时,CHEO可以通过增加MRSA细胞表面疏水性和减小细胞表面电荷导致细菌发生凝聚而死亡。经过CHEO(1/2MIC,MIC和2MIC)处理后,菌液OD260值分别增加了0.121,0.190和0.335;电导率在处理1 h后,比对照分别增加了97.53%,98.03%和98.36%;可溶性蛋白条带含量明显减少。(2)刃天青法实验结果表明,具有新陈代谢活力的MRSA所占的百分比随着精油浓度的增加而下降;碘乙酸、丙二酸和磷酸钠分别是糖酵解途径、三羧酸循环、戊糖磷酸途径的三种典型抑制剂,三种抑制剂对CHEO的叠加率分别是20.45%,38.64%和36.36%,其中与碘乙酸的叠加率最小(P<0.05),表明CHEO是通过EMP途径抑制细菌呼吸代谢,并且通过测定EMP途径中三种关键酶活性验证了这一结论。当ATP含量受到CHEO抑制而导致其含量显著减少时,相应的ATPase表现为显著下降趋势;在4 h内,经精油处理后的碱性磷酸酶和β-半乳糖苷酶的表达活性随着时间的增加而降低。(3)通过测定胞内DNA含量和胞内核酸荧光强度发现,DNA在MRSA内合成受到CHEO抑制,其含量显著降低(P<0.05),研究初步表明了CHEO不能从抑制拓扑异构酶的酶活这一方面影响菌体内DNA的超螺旋密度;CHEO对pvl基因的表达量存在显著影响(P<0.05),且表现出CHEO浓度依赖性。MIC,1/2MIC,1/4MIC和1/8MIC组的pvl基因表达量分别是未处理组的12.31%,35.24%,63.64%和80.18%。这说明CHEO可以通过抑制pvl基因的表达从而降低PVL侵袭素的生成,降低MRSA的危害性。(4)以鸡肉、猪肉和牛肉作为被MRSA感染的肉类制品代表,研究CHEO对肉类制品在贮藏保鲜过程中的抑菌保鲜效果;残存菌数和菌落总数实验证明CHEO可以抑制MRSA和其它微生物在肉中的繁殖;MetMb%、pH值和SEA含量三个理化指标值表明CHEO可以减缓脂质氧化速度和减少有害物质的含量,从而在一定时间内保持肉的品质;色度评价和质构分析结果表明该CHEO本身不会对肉类制品产生负面影响,而且能够有效维持肉制品外观色泽,在肉类贮藏中具有很大应用潜力。