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近几年,人们越来越关注天然食品物质或者中草药作为饲料添加剂对肠道健康的作用,京尼平苷是从梔子中提取的主要药效活性成分,具有拮抗脂多糖作用。本研究针对这一情况,进行京尼平苷对小鼠肠道炎症相关指标检测,探索京尼平苷作为饲料添加剂对肠道健康的作用,旨在为研究中草药作为饲料添加剂对畜禽肠道健康、预防肠黏膜损伤等肠道疾病提供理论基础。本研究首先选用体重为22-25 g的雄性健康ICR小鼠50只,随机分为5组,每组10个重复,试验前预饲1周,试验期内自由采食饮水。对照组注射生理盐水,LPS组经腹腔浓度分别为2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg。注射脂多糖6h后,经眼球采血,分离血清进行ELISA检测(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α、IAP水平。同时采集十二指肠、空肠、回肠制作组织切片并HE染色,进行绒毛高度、隐窝深度的检测。第二部分试验选用体重相近雄性ICR小鼠35只,随机分为7组,每组5只,分别在0 h、6 h、12 h、24h、48h、72h断颈处死小鼠,采集十二指肠、空肠、回肠,用以IAP、NF-κB P65mRNA和蛋白表达量的检测以及IAP与NF-κB免疫共沉淀检测。通过上述试验构建LPS诱导的肠炎模型后,选用体重相近雄性ICR小鼠25只,随机分为5组,其中一组作为对照组进行正常饲养,不对其进行LPS与京尼平苷处理,试验组小鼠腹腔注射5 mg/kg LPS,注射6h后,进行不同浓度的京尼平苷灌胃,灌胃浓度为0g/mL、0.25 g/mL、0.5 g/mL、1 g/mL,断颈部处死后,采集十二指肠、空肠、回肠,用以LAP、NF-κBP65的mRNA和蛋白的检测。试验结果如下:1)不同LPS浓度对小鼠免疫功能的影响小鼠血清检测结果显示,与对照组相比注射5 mg/kg LPS时,小鼠血清中IAP、(1L)-1β、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α水平达到高峰(p<0.05),随着LPS浓度的升高,各细胞因子及IAP分泌受到抑制。2)不同LPS浓度对小鼠组织形态的影响对小鼠小肠组织的病理学观察,对照组腹腔剖开后,形态正常、并未见出血;5 mg/kg LPS处理过的小鼠,剖开后有明显的出血症状,肠道存在破损、肿胀的状况。绒毛高度和隐窝深度结果显示,与对照组相比,小鼠十二指肠、空肠、回肠的的绒毛高度、绒毛高度和隐窝深度比值随着LPS浓度增高而降低;隐窝深度在各浓度梯度下,逐渐增高。3)不同LPS诱导时间小肠IAP、ANF-κB P65 mRNA的影响十二指肠、空肠、回肠结果如下:与对照组相比,随着时间延长KAP mRNA相对逐渐增加,在6 h LAP mRNA相对表达量显著升高(p<0.05)且达到高峰,之后随着时间延迟LAP mRNA相对表达量逐渐降低;与对照组相比,LPS致炎时间为24 h时,NF-κB P65 mRNA相对表达量达到高峰(p<0.05)。4)不同LPS诱导时间对小肠IAP、NF-κB P65蛋白的影响试验组小鼠各肠段IAP、NF-κB P65蛋白相对表达量在LPS注射时间为6 h达到高峰,随着时间延长均会有一定的下降,直至72 h恢复至正常水平。5)LPS诱导下小鼠回肠IAP和NF-κB之间的相互作用经过免疫共沉淀检测,LPS诱导时可在IAP的免疫沉淀中检测出了 NF-κB P65蛋白;同时也在NF-κB P65的免疫沉淀中检测出IAP蛋白。6)不同浓度京尼平苷对致炎小鼠小肠LAP、NF-κB P65 mRNA的影响与对照组相比,灌胃京尼平苷1 g/mL能够抑制小鼠十二指肠、空肠、回肠的LAP、NF-κB P65 mRNA相对表达量。7)不同浓度京尼平苷对致炎小鼠小肠IAP、NF-κB P65蛋白的影响与对照组相比,灌胃京尼平苷1 g/mL,小肠IAP、NF-κB P65蛋白相对表达量最低,随着浓度降低,小肠IAP、NF-κB P65蛋白相对表达量增加。综上所述,小鼠在注射5mg/kg LPS时,即可诱导肠黏膜损伤,使各肠段VH值降低、CD值升高,且各细胞因子浓度达到最高,可作为后续炎症性肠炎适宜的诱导剂量;LPS进行诱导炎症时IAP、NF-κB P65两个蛋白在小鼠回肠中存在相互作用关系,表明两个蛋白存在相关性。1 g/ml京尼平苷,可作为今后研究京尼平苷对LPS诱导的肠损伤的适宜浓度。