自身免疫性疾病患者血清中抗bFGF自身抗体的检测

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目的:探索自身免疫性患者血清中抗bFGF自身抗体的存在状况。收集bFGF抗体阳性个体的的外周血淋巴细胞,为扩增Fab抗体基因及筛选人源性bFGF抗体准备材料。 方法:对包被bFGF的碳酸盐缓冲液的pH条件、bFGF抗原的用量、封闭条件及酶标板类型等条件进行优化,用间接ELISA法检测自身免疫性疾病患者血清中的抗bFGF抗体。采用建立的最佳检测条件对395例自身免疫患者的血清中的bFGF自身抗体IgG和IgM进行检测。 结果:最佳的间接ELISA条件:用pH9.8的碳酸盐缓冲液稀释抗原bFGF为0.5×10-3μg/μL包被江苏国产酶标板;0.2%白明胶+1%BSA作为封闭液。采用优化的ELISA条件检测发现某些SLE、RA、慢性肾炎、DM、FOU、ITP病人血清中能检测到高滴度的bFGF自身抗体,其A492值明显高于正常人。从每组患者的阳性平均值可知,阳性个体血清中抗bFGF-IgG、抗bFGF-IgM抗体的平均值高于正常人的平均值的两倍加上标准偏差。SLE、RA、DM病人血清中的抗bFGF的IgG自身抗体的平均值分别为0.194±0.059、0.215±0.104、0.239±0.050,高于正常对照组的平均值0.173±0.02,SLE、RA、DM、ITP病人血清中的抗bFGF-IgM自身抗体的平均值分别为0.206±0.061、0.234±0.117、0.248±0.040、0.225±0.060,高于正常对照的平均值0.182±0.037。某些SLE、RA、慢性肾炎、DM、FOU、ITP病人血清中能检测到高滴度的bFGF自身抗体,其A492值明显高于正常人。从每组患者的阳性平均值可知,阳性个体血清中抗bFGF-IgG、抗bFGF-IgM抗体的平均值高于正常人的平均值的两倍加上标准偏差。 结论:在部分自身免疫性疾病患者体内能够检测到bFGF的自身抗体,对bFGF自身抗体的调查研究将为自身免疫疾病的机制的探讨奠定基础。
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