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目的:研究转化生长因子β-Smad相关信号通路在胆管癌细胞上皮间质转化中的作用。方法:根据单独或联合用药的方式(TGFβ1、SB431542、SB525334)设置4或6个分组,分组处理胆管癌RBE细胞。(1)观察各组细胞形态学变化;(2)Transwell法检测RBE细胞迁移及侵袭性变化;(3)Western blot法检测Smad4、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及Slug的蛋白表达变化。结果:1.TGFβ1组细胞形态较对照组发生明显改变,细胞细长,似纺锤形,呈现EMT样趋势;而SB525334组与SB431542组细胞较对照组细胞,形态无明显变化。2.RBE细胞迁移性、侵袭性的改变。(1)迁移性改变:穿过小室的细胞数在对照组为(85.66±7.76)个,TGFβ1组为(118.17±12.69)个,SB431542组(53.00±5.51)个、TGFβ1+SB431542组(86.33±9.67),SB525334(52.50±7.45)个,TGFβ1+SB525334组(81.00±7.62)个。TGFβ1组VS.对照组,其细胞数目明显增多,差异具有统计学意义(*P<0.05);SB525334组/SB431542组VS.对照组,其细胞数目明显减少,差异具有统计学意义(*P<0.05)。(2)侵袭性改变:穿过小室的细胞数在对照组为(73.83±9.47)个,TGFβ1组为(127.83±7.33)个,SB431542组(59.83±7.28)个、TGFβ1+SB431542组(79.67±7.31),SB525334(55.67±7.26)个,TGFβ1+SB525334组(76.00±8.51)个。TGFβ1组VS.对照组,其细胞数目明显增多,差异具有统计学意义(*P<0.05);SB525334组/SB431542组VS.对照组,其细胞数目明显减少,差异具有统计学意义(*P<0.05)。3.Smad4蛋白及E-cadherin、N-cadherin、Slug蛋白表达的变化。(1)Smad4蛋白表达的变化:TGFβ1组与对照组相比,Smad4蛋白的表达水平明显增高,SB525334/SB431542组中Smad4蛋白呈现降低趋势。(2)E-cadherin、N-cadherin、Slug蛋白表达的变化:与对照组相比,TGFβ1处理组中E-cadherin蛋白表达显著降低,间叶性标志物N-cadherin及Slug蛋白显著增加。SB431542/SB525334组与对照组相比,E-cadherin蛋白呈增加趋势,而N-cadherin及Slug蛋白则明显降低。结论:1.TGFβ1可诱导RBE细胞发生形态学上的EMT转换。2.TGFβ可促使REB细胞的迁移和侵袭作用显著增加,而SB525334/SB4315442可以阻断该效应。3.TGFβ1能够促进Smad4蛋白的表达水平,并对N-cadherin、Slug蛋白的表达呈促进作用,对E-cadherin蛋白的表达起抑制作用。TβRⅠ抑制剂(SB431542/SB525334)可促进E-cadherin蛋白的表达,抑制N-cadherin、Slug蛋白的表达,发挥抑制EMT的效应。