论文部分内容阅读
目的:肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是泌尿生殖系统中常见恶性肿瘤之一,是起源于肾实质泌尿小管上皮系统的一种常见肾脏恶性肿瘤,约占成人恶性肿瘤的2%~3%,占肾脏原发恶性肿瘤的80%~90%[1]。近年来由于肾癌早期症状不明显且无特异性的特点使其死亡率呈现上升的趋势。目前肾癌的发生及发展的分子机制尚未清晰,放化疗对其治疗效果不佳,虽然根治性的肾切除手术仍是目前最有效果的治疗方法,然而近30%局限性肾癌患者在治疗后出现肿瘤复发[2]。肿瘤的复发、转移仍是威胁患者生命的主要因素。目前除影像学检查结果外尚缺乏早期的实验室诊断指标,使得对肾癌早期发现早期诊断及治疗具有一定的难度。为提高肾癌患者的治疗效果,寻找新的肾癌早期诊断、判断预后的生物标志物并深入研究其在肾癌的发生发展中的作用具有重要意义。长链非编码RNA在肿瘤发生发展中的作用已越来越明显,可在多个水平上调控基因的表达,参与肿瘤的生长、侵袭及转移。而其中的MALAT-1在人类多种肿瘤组织中异常表达,其异常高表达改变了肿瘤细胞的生物学表型,促使肿瘤细胞增殖能力提高,转移能力和侵袭能力增强,促进了肿瘤的发生发展。通过对乳腺癌的预测及筛选发现MALAT-1受上游转录因子Snail、sox-5、FOXQ1和RUNX1的调控,同时又可调控下游hsa-miR-320a的表达,所以MALAT-1与Snail共同作为“促癌基因”在肿瘤的发生发展过程中起到至关重要的作用。本课题以肾癌为研究对象,检测MALAT-1与其上游转录因子Snail在肾癌新鲜离体癌及正常肾组织中的表达,探讨MALAT-1与肾癌及Snail与肾癌之间的相关性、MALAT-1与Snail的相关性以及其可能的作用机制。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chainreaction, RT-PCR)技术分别检测58位肾细胞癌患者癌及正常肾组织中LncRNAs重要成员MALAT-1与其上游转录因子Snail的各自转录水平,探讨各自在肾癌和正常肾组织中的表达关系,以及MALAT-1与Snail之间的相关性。结果:1.1肾细胞癌(RCC)组织中MALAT-1基因mRNA表达情况MALAT-1基因mRNA在肾细胞癌和正常肾组织中的表达量分别为1.08±0.26和0.84±0.27,肾细胞癌组织中MALAT-1基因的mRNA表达量明显要高于正常肾组织,两者的差异有统计学意义(P<0.05)。分别对性别、年龄、肿瘤大小及TNM分期进行分组统计分析得出MALAT-1在肾细胞癌中的表达与性别(男性组与女性组)、年龄(<60与≥60)、肿瘤大小(≤7cm与>7cm)以及TNM分期(Ⅰ+Ⅱ与Ⅲ+Ⅳ)均无关(P>0.05)。1.2肾细胞癌(RCC)组织中Snail基因mRNA表达情况Snail基因mRNA在肾细胞癌和正常肾组织中的表达量分别为0.83±0.26和0.61±0.33,肾细胞癌组织中Snail基因的mRNA表达量明显要高于正常肾组织,两者的差异有统计学意义(P<0.05)。分别对性别、年龄、肿瘤大小及TNM分期进行分组统计分析得出Snail在肾细胞癌中的表达与性别(男性组与女性组)、年龄(<60与≥60)、肿瘤大小(≤7cm与>7cm)以及TNM分期(Ⅰ+Ⅱ与Ⅲ+Ⅳ)均无关(P>0.05)。2MALAT-1基因mRNA与Snail基因mRNA在人肾细胞癌(RCC)中相对表达量之间的关系MALAT-1基因mRNA在肾细胞癌中相对表达量与Snail基因mRNA在肾细胞癌中相对表达量分别经正态性检验符合正态分布,再行直线相关统计方法得出MALAT-1基因mRNA与Snail基因mRNA在人肾细胞癌(RCC)中的相对表达量成正相关(r=0.396,P=0.003<0.01)。结论:1MALAT-1基因在肾细胞癌组织中的相对表达量明显高于正常肾组织,提示MALAT-1基因的异常表达与肾细胞癌的发生发展有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小及临床分期等因素无关。2Snail基因在肾细胞癌组织中的相对表达量明显高于正常肾组织,提示Snail基因的异常表达与肾细胞癌的发生发展有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小及临床分期等因素无关。3通过本研究的检测发现MALAT-1和Snail在肾细胞癌组织中表达水平均显著上调,MALAT-1和Snail之间存在着正相关,Snail作为MALAT-1的上游转录调控因子,可能调控MALAT-1基因发挥促进肿瘤发生发展的作用,Snail基因将成为肾癌的诊断及靶向治疗的新靶点。