目的：体外研究表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor，EGFR）抑制剂吉非替尼（Gefitinib）和雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin，mTOR）抑制剂依维莫司（Everolimus）在gefitinib耐药鼻咽癌细胞中联合作用的效果及机制。方法：MTT法测定单药及联合用药对人鼻咽癌细胞株HONE1的增殖抑制；流式细胞术检测药物单独或联合作用于HONE1细胞株48h、72h后，各组细胞凋亡及周期分布的改变；Western Blot检测单药及联合用药48h后，HONE1细胞中磷酸化AKT（Phospho-AKT，p-AKT）和磷酸化S6K（Phospho-S6K，p-S6K）表达水平的变化。结果：MTT法结果显示gefitinib和everolimus对HONE1细胞的生长抑制均呈剂量依赖性，并由此计算出，gefitinib的IC50为17.92μmol/L，everolimus的IC50为2.46nmol/L，但二者的联合作用并没有表现出明显的协同效应（P>0.05）；流式细胞术显示gefitinib及everolimus作用于HONE1细胞时，可诱导凋亡，引起G0/G1期细胞阻滞，两种作用均具有时间依赖性，而二者联合的效果并未表现出明显的优势(P>0.05)；Western Blot显示gefitinib对p-AKT抑制作用不明显，everolimus可下调p-S6K的表达，但同时上调了p-AKT的表达，联合用药对p-S6K和p-AKT表达的抑制作用并不明显强于单药。结论：mTOR抑制剂everolimus并不能逆转gefitinib耐药鼻咽癌细胞株HONE1的耐药性，两者联合的效果在鼻咽癌细胞中没有明显优势，EGFR/AKT信号通路与mTOR信号通路的关系及其在鼻咽癌细胞中的作用机制有待进一步研究。