三氧化二砷调控HL-60细胞hTERT基因启动子及相关转录因子NF-κB机制研究

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目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对HL-60细胞人端粒酶逆转录酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因启动子及相关转录因子NF-κB的作用机制。方法:1.将不同浓度的As2O3作用HL-60细胞,利用实时荧光定量PCR技术和Western blotting技术分别检测hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平上的变化2.利用RNAi技术干扰NF-κB基因表达,利用实时荧光定量PCR技术和Western blotting技术,分别检测HL-60细胞hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,同时利用CCK-8分析法,流式细胞术分别检测HL-60细胞的增殖和凋亡变化。结果:1.不同浓度的As2O3作用于HL-60细胞后,hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平上的表达受到明显抑制(P<0.01)。2.沉默转录因子NF-κB的表达,hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表达受到明显抑制(P<0.01)。3.沉默转录因子NF-κB的表达,有效的抑制HL-60细胞的增殖(P<0.01),以干扰48h最为显著。4.沉默转录因子NF-κB的表达,有效的促进HL-60细胞的凋亡(P<0.01)。结论:1.不同浓度的As2O3作用于HL-60细胞后,可促进HL-60细胞凋亡,并呈一定的量效关系。2.沉默转录因子NF-κB的表达可促进HL-60细胞的凋亡,抑制其增殖。
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