五味子蜂花粉对急性心肌梗死大鼠的保护作用和机制研究

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本论文研究了五味子蜂花粉提取物(Schisandra chinensis Bee Pollen Extract,SCBPE)对异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)诱导大鼠急性心肌梗死模型的保护作用和潜在的作用机制,旨在为其功能开发提供依据。主要研究内容及结果如下:1.SCBPE抗氧化活性和对ISO诱导大鼠急性心肌梗死模型的保护作用评价:五味子蜂花粉的花粉粒纯度超过90%。测得SCBPE的总酚、总黄酮含量分别为52.92±1.47 GAE mg·g-1和30.30±1.09 RE mg.g-1。DPPH 的 IC50 值为 44.14 μg·ml-1,ABTS 和 FRAP 法的结果为 0.37±0.01 和 0.33±0.01 TE mM·g-1。72只SD大鼠随机分为6组,分别是空白组、模型组、阳性组、低(600 mg·kg-1)、中(1200 mg·kg-1)、高剂量组(1800 mg·kg-1),给药28天预处理后皮下注射65 mg·kg-1 ISO造模两天(第29、30天),麻醉处死后取组织和血液样本。相对模型组,中高剂量组的死亡率分别降低了 16.67%和25.00%,心脏和左心室指数分别降低了 14.19%、22.12%和9.97%、13.62%。而且,中高剂量组血清心肌酶(AST、LDH、CK、α-HBDH)水平均有显著性降低,心脏组织中SOD、GPX、CAT活性呈剂量依赖性提高,而MDA含量显著降低。组织显微观察发现,模型组心肌纤维断裂严重,出现大面积梗死区域、炎性细胞浸润和血管充血等现象。然而,这些病理变化在中高剂量组中则有明显缓解,表明了 SCBPE具有心肌保护作用。2.SCBPE对ISO诱导大鼠急性心肌梗死模型的保护作用机制研究:Western Blot测定各组大鼠心脏组织结果表明,模型组Bax、Nrf-2和HMGB-1蛋白表达量明显增多,而Bcl-2、HO-1蛋白表达量明显减少。中、高剂量组Bax、HMGB-1表达量明显减少,而Bcl-2、Nrf-2和HO-1表达量显著升高。上述结果提示SCBPE可能是通过Nrf-2/ARE通路增强系统抗氧化能力,抑制HMGB-1所介导的炎症反应,抑制Bax和Bcl-2调节的细胞凋亡,从而起到心肌保护作用。3.SCBPE干预ISO诱导大鼠急性心肌梗死模型的代谢组学研究:所有组别的PCA得分图中,除了无法将模型和阳性组进行区分外,均能与其他组明显区分,而且中高剂量组有向正常组靠近的趋势。在OPLS-DA模型中,各组血清样本得到进一步区分并筛选出具有区分意义的差异代谢物,最终鉴定出了氨基酸、鞘氨醇、棕榈油酸、花生四烯酸、溶血磷脂酰胆碱、肌酐等等共23个代谢物。结果表明,SCBPE对急性心肌梗死大鼠异常代谢有保护作用,主要涉及氨基酸代谢、鞘氨醇代谢、甘油磷脂代谢、花生四烯酸、脂质代谢等多条代谢途径。综上可知,SCBPE对ISO致急性心肌梗死大鼠具有保护作用,而该作用很可能与通过Nrf-2/ARE通路来增强系统抗氧化活力,及抑制炎症反应和细胞凋亡进程有关。此外,运用代谢组学技术找出组间差异代谢物,为进一步阐述保护作用提供新的依据。本研究所证实的SCBPE心肌保护作用,为今后五味子蜂花粉在预防或辅助治疗心血管疾病提供了理论依据。
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