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既往研究发现Rictor/mTORC2介导TGF-β1诱导的成纤维细胞的活化和肾间质纤维化。但是,Rictor/mTORC2在巨噬细胞活化中的作用和机制尚不清楚。本研究运用可诱导特异性Rictor基因敲除的原代骨髓源性巨噬细胞(BMMs),探讨Rictor/mTORC2在巨噬细胞活化中的作用及机制。敲除Rictor基因的BMMs或抑制剂阻断细胞中PKCα,细胞的迁移能力明显受到抑制。敲除Rictor基因的BMMs或阻断细胞中Akt明显抑制巨噬细胞向M2型极化。而且,敲除Rictor基因BMMs表达促纤维化因子如CTGF、PDGFA、PDGFB和VEGFC明显下调,并且来源于Rictor-/-巨噬细胞的条件培养上清不能有效活化成纤维细胞。巨噬细胞促纤维化因子的表达依赖于mTORC2/Akt信号通路。所以,研究结果表明Rictor/mTORC2信号通路在巨噬细胞活化中发挥重要作用。巨噬细胞浸润在肾脏纤维化中发挥重要作用。本论文的前一部分研究发现Rictor/mTORC2调控巨噬细胞迁移、M2型极化及促纤维化因子的表达。本论文此部分着重研究巨噬细胞中Rictor/mTORC2信号通路在UUO和IRI诱导的肾脏间质纤维化过程中的作用。本研究发现小鼠肾间质纤维化时,巨噬细胞中Rictor/mTORC2信号通路被激活;敲除巨噬细胞中Rictor基因减轻UUO或IRI后肾组织间质纤维化、炎性细胞浸润、同时抑制巨噬细胞增殖、极化以及促纤维化因子的表达。过继转输实验提示与Rictor+/+组相比,过继转输Rictor-/-骨髓源性巨噬细胞组肾组织间质纤维化明显得到改善。所以,本研究结果表明Rictor/mTORC2信号通路在巨噬细胞活化和纤维化中占有重要作用,靶向巨噬细胞Rictor/mTORC2可能成为临床治疗肾脏纤维化的新方向。目前,临床上尚没有用于治疗肾间质纤维化的特效药。本部分研究旨在开发治疗肾间质纤维化的药物。本论文前两部分研究发现mTORC2信号通路在巨噬细胞活化和肾间质纤维化中发挥巨大作用。我们推测靶向这一信号通路可减少巨噬细胞浸润及肾间质纤维化。通过查阅文献我们发现槲皮素可以靶向mTORC2信号通路。槲皮素(3,3,4,5,7-五羟基黄酮),是一种黄酮类化合物,广泛存在于植物及人们的日常饮食中。槲皮素具有抗炎的生物学活性。Go6976是特异靶向mTORC2信号通路下游信号分子PKCα。Go6976是人工合成的化合物。本研究发现向UUO小鼠注射槲皮素或Go6976后,纤维化肾脏中巨噬细胞浸润明显减少、炎性因子表达下降及梗阻性肾病明显改善。所以,本研究证实槲皮素或Go6976靶向mTORC2信号通路具有潜在的临床应用前景,或可成为治疗慢性肾脏病的药物。