铜、银荧光纳米簇的合成及在生物小分子分析中的应用研究

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金属荧光纳米簇由于其独特的光学性质、生物相容性、催化性能等优点,被广泛应用于环境检测、生物检测和细胞成像等领域。金属纳米簇的荧光性质与纳米簇的合成方法和模板分子有密切的联系,目前关于荧光纳米簇的合成的方法很多,有些荧光纳米簇,特别是铜、银荧光纳米簇的合成步骤相对繁琐,条件苛刻,合成的纳米簇稳定性较差,限制了其在各个领域的应用。本论文主要以铜、银纳米簇的合成及应用为研究对象,探讨了铜、银荧光纳米簇的合成方法的改进和潜在的应用前景,最终通过优化合成条件,得到了荧光性质新颖、稳定的铜纳米簇,通过使用改进的合成法,得到荧光银纳米簇,并将它们应用于抗坏血酸和多巴胺的检测中。论文具体研究内容分三部分,具体如下:1、研究了胰蛋白酶-铜纳米簇的合成并用于抗坏血酸的检测。胰蛋白酶和铜混合后在碱性条件下能生成紫色的胰蛋白酶-铜络合物,在抗坏血酸的存在下可以生成具有荧光的铜纳米簇。所生成的荧光铜纳米簇的荧光发射峰位于450 nm,荧光强度与合成时加入的抗坏血酸的浓度有一定的线性关系。基于此,我们建立了一种基于胰蛋白酶-铜纳米簇检测抗坏血酸的荧光光谱法,实现了浓度范围为0.5-30.0mM的抗坏血酸的检测,检出限为16.5μM。2、研究了以抗坏血酸为模板合成了新型荧光铜纳米簇的方法。目前使用抗坏血酸为模板很难合成出稳定的铜纳米簇,本论文通过控制温度、铜和抗坏血酸的比例、pH等条件,分别合成出发射蓝色和绿色荧光的两种铜纳米簇,并对合成的铜纳米簇的光学性质、组成进行了研究和表征。结果显示,蓝色铜纳米簇的激发波长为380 nm,发射波长为452 nm;绿色铜纳米簇的激发波长为376 nm,发射波长为534 nm。这种发绿色荧光的铜纳米簇是一种新型的荧光铜纳米簇,相比于文献报道的其他铜纳米簇有良好的稳定性,有潜在的应用前景。3、以牛血清白蛋白为模板,用光照还原法建立了一种绿色的、快速合成牛血清白蛋白-银纳米簇的方法。与传统的合成方法相比,本实验用光照还原,不需要还原剂,合成的银纳米簇荧光性质也与常见的蛋白质银纳米簇不同,发射峰位于550 nm。此外,这种银纳米簇与多巴胺有良好的选择性作用,在微量多巴胺存在下,银纳米簇的紫外吸收逐渐增加,且与加入的多巴胺的浓度成线性关系。基于此,本文建立了高选择性、高灵敏度的多巴胺的检测方法,实现了浓度范围为5.0-100.0?M的多巴胺检测,检出限为1.6121μM。
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