地锦和五叶地锦组织培养及体细胞胚发生的研究

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地锦和五叶地锦是葡萄科(Vitaceae)地锦属(Parthenocissus Planch.)植物中最常见的栽培种,是我国优良的垂直绿化攀援植物。本文重点对地锦和五叶地锦的组织培养及体细胞胚发生进行了研究,为地锦属植物的细胞工程研究奠定基础。主要试验结果如下: (1) 在引进五叶地锦的组织培养过程中,用种子作外植体建立无菌体系的培养基是不加PGR的1/2MS或B5培养基;芽继代增殖培养的培养基是B5+BA 0.5 mg/L+IBA 0.05(或0.1)mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L(以下培养基中蔗糖和琼脂的用量相同)或B5+BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L;诱导生根的最适培养基是B5+IBA 0.1mg/L;移栽成活率达90%以上。 (2) 通过试验得知,本地地锦品种启动培养时,最适合的基本培养基为B5,适宜的BA浓度为0.3 mg/L,茎尖是启动培养的适宜外植体;地锦增殖培养的适宜培养基为B5+BA 1.0(或1.5)mg/L+IBA 0.1 mg/L或B5+BA 1.0(或1.5)mg/L+NAA 0.05 mg/L;地锦试管苗生根培养的适宜培养基为B5+IBA 0.2 mg/L,经炼苗移栽,成活率可达到93%以上。 通过试验比较,本地地锦品种褐化较轻,而引进品种的褐化较严重。添加VC是引进地锦品种组织培养中防止褐化较有效的方法,比AC和PVP的效果好,VC适宜的浓度为1.5 g/L,褐化率只有25%。 (3) 通过体细胞胚发生的研究得知,地锦子叶在MS附加BA 0.3 mg/L和NAA 0.1 mg/L培养基上或1/2MS附加BA 0.5 mg/L和NAA 0.1 mg/L以及1/2MS附加BA 0.3 mg/L和NAA 0.2 mg/L的培养基上都能诱导产生体细胞胚;地锦子叶的叶柄在1/2MS附加BA 0.3 mg/L的培养基上也产生了体细胞胚,但体细胞胚的诱导率很低,最高只有18.8%。添加水解酪蛋白没有提高体细胞胚的诱导率,暗培养对体细胞胚诱导率也没有明显的改善。 五叶地锦没有体细胞胚的发生,说明不同基因型之间的体细胞胚发生差异是很大的。
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