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椪柑中含有多种有效的化学成分,如类黄酮、香精油、色素、香豆素、甘油糖脂质、萜类等。其中具有多种生理活性的橙皮苷是椪柑类特有的一种类黄酮物质,本文就椪柑果皮中橙皮苷的提取工艺进行优化,同时对橙皮苷及其它椪柑提取物进行活性探讨,为椪柑资源的综合利用提供依据。本研究的主要内容如下:
(1)橙皮苷检测方法
分别采用紫外分光光度法和高效液相色谱法对橙皮苷产品进行检测,并对两种检测方法进行了比较。结果表明两种方法均准确可靠,且具有较好的相关性。本文选用简便易行的紫外分光光度法进行相关测定。
(2)椪柑果皮中橙皮苷提取工艺优化
本研究采用常规提取法,微波辅助提取法和超声波辅助提取法对椪柑果皮中的橙皮苷进行提取,并对三种方法进行了比较。结果表明,超声波辅助提取优于微波辅助提取和常规提取,其中超声波提取的最佳条件为:提取温度20℃,提取时间70min,液料比30:1。在此条件下,橙皮苷的得率达到5.275%,提取率达到78.43%。与常规提取相比,得率增加4倍,提取率增加58.21百分点,且放大实验结果比较稳定。
(3)椪柑枝叶中橙皮苷含量随生长季节的变化情况
对椪柑的枝、新枝、叶、新叶中的橙皮苷含量随生长期进行考察,发现新生长的椪柑叶中有比较丰富的橙皮苷,达1.0-1.3%,椪柑枝中的橙皮苷含量在0.2%-0.9%之间,而每年有大量的椪柑枝叶被废弃,对这些资源进行深入研究,能够为资源再利用提供有利的依据。
(4)椪柑提取物的抗氧化与抑菌实验
分别对椪柑不同部位(椪柑树嫩枝、树叶,椪柑果皮)进行提取,得到相应提取物。首先采用亚甲基兰分光光度法对各提取物清除羟基自由基的效果进行比较,发现椪柑嫩枝水提物的效果最好,效果最好,且在一定范围内呈浓度依赖性,效果优于杜仲素、杜仲绿原酸、茶多酚等植物提取物。同时发现椪柑嫩枝提取物中水溶性总黄酮含量与其清除效果之间有较好的相关性,提取物中总黄酮含量越高,对羟基自由基的清除效果越好。其次考察了不同提取物抑制油脂氧化的效果,发现椪柑树叶90%的乙醇提取物对油脂氧化有较好的抑制效果,仅次于BHT,优于橙皮苷等其它天然产物。第三,采用K-B纸片扩散法,对椪柑提取物与其它天然提取物进行体外抑菌实验,结果显示橙皮苷及椪柑枝的70%乙醇提取物、椪柑叶的70%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌有抑制效果,但次于阳性对照;而椪柑枝的70%乙醇与90%乙醇的提取物对藤黄八叠球菌的抑制效果要好于阳性对照;同样,椪柑枝的50%乙醇提取物、椪柑枝的70%乙醇提取物、椪柑叶的70%乙醇提取物、椪柑叶的90%乙醇提取物对枯草芽孢杆菌有较好的抑制效果,且优于阳性对照。