罗汉果黄酮提取条件与纯化工艺的研究

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罗汉果[Momordicu grosvenori swingle]是葫芦科属植物,具有清肺镇咳的功效,现已广泛应用于医药保健上。本论文通过回流提取法提取罗汉果黄酮,再对其进行单因素试验、正交试验和响应面分析,得出最佳提取条件;并通过静态-动态吸附试验和聚酰胺树脂试验纯化提取物。主要研究结果如下:1.采用回流提取的方法对罗汉果黄酮的最佳提取条件进行摸索。对回流提取影响因素:乙醇溶液浓度、料液比、提取时间、提取温度、提取次数进行单因素实验。确定最佳提取条件:在80℃的水浴条件下,用30倍量的80%乙醇回流提取1h,提取一次,所得到的黄酮提取率最高。2.在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度进行4因素3水平的正交实验,确定最佳提取工艺条件:以80%乙醇体积分数、料液比为1:30,在80℃的水浴温度下提取1h,提取一次所达到的提取效果最好,得率达1.52%。3.根据单因素实验和正交实验的结果选择乙醇溶液浓度,提取温度,提取时间作为响应面设计的因素,研究三者之间是否存在交互作用。每个因素选择3个水平进行响应面分析,进行提取工艺的优化。结果表明:乙醇浓度为76.59%,提取温度为84.29℃,提取时间0.76h时,预测最优值为1.573%。结合生产实际,可调整其最佳工艺条件为乙醇浓度77%、提取温度85℃、提取时间48mmin,得率为1.538%。4.通过静态-动态吸附试验,考察4种不同型号的大孔吸附树脂纯化效果,确定选择AB-8大孔树脂,其纯化罗汉果黄酮的条件确定为:供试品浓度为2.5mg/mL, pH为4,上样流速为2BV/h,用50%乙醇溶液洗脱,流速为1.5BV/h。检测计算罗汉果黄酮纯度为39.7%。5.通过聚酰胺树脂进一步纯化,确定最佳条件为:供试品浓度为35mg/mL,流速为1BV/h,用60%的乙醇溶液进行洗脱,流速为1.5BV/h。通过HPLC检测,提取液中含有黄酮类物质,计算纯度达到81.7%。
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