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钼是动物必需的微量元素,具有重要的生物学作用,但过量的钼可以导致动物中毒,且存在明显的种属差异,以反刍动物最为敏感。豫西丘陵地区钼储量大,是世界特大型有色金属矿床,随着钼矿业的发展,企业排放对环境的污染日趋严重,家畜因采食高钼污染的饲料或饮水而中毒的事件日益增多,且直接威胁着人类健康。钼的毒性与其它元素的作用有关,但锌及锌、铜与动物钼中毒的关系,尚无系统研究资料。本试验从环境学、临床学、病理学、组织学、血液学、免疫学、酶学、骨学等方面研究锌、铜与钼的相互作用,为钼中毒的的防治提供依据。研究内容如下:
1.钼在食物链中生态分布研究
实验利用生态学和环境毒理学的方法,对豫西矿区水、土壤、植物等食物链中相关因素中钼的含量进行随机样品测定,结果表明:矿区环境中土壤、水、植物等样品中钼的含量均超出正常范围,钼矿在一定区域内对生态环境造成一定的污染,土壤、水和植物之间的钼含量具有极好的相关性(P<0.05),小白菜、萝卜和豆科植物等具有一定的富集钼的作用,可以作为指示性矿化植物,用于建立地方病和矿山职业病的生态环境预防一预警体系及药用性植物食品开发等。
2.钼对绵羊的毒性作用研究
选择健康小尾寒羊12只,体重在25±1.3kg,随机分为4组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组每日每千克体重分别灌服60mg,30mg、15mg剂量的钼,Ⅳ组灌服去离子水作为对照,试验周期为90d。定期采羊毛、血、肝脏等组织,用原子吸收分光光度计测定组织中钼含量,记录临床表现,观察病理学变化。定期对长骨X线检查;观察骨骼变化;用精密万能实验机对骨骼进行扭转和冲击实验。
结果表明:血液钼的含量随试验剂量增加和时间的延长呈增加趋势;Ⅰ组含量与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组差异极显著,Ⅱ、Ⅲ与Ⅳ组差异显著。羊毛钼含量随添加剂量增加呈稳定增长趋势,组间羊毛钼含量差异显著或极显著。心脏、脾脏、骨骼钼含量Ⅰ与Ⅲ、Ⅳ组含量差异极显著。骨骼、羊毛中的钼含量的变化与日粮摄入水平、摄入时间具有极好的相关性,且能准确反应体内钼含量,可以作为评定羊体内钼状态的指标。30-60mg的钼,可以致绵羊表现典型的临床中毒症状和病理学变化;以肝脏、肾脏、心室肌和骨骼变化明显。60mg钼可使绵羊骨骼骨质疏松,密质骨变薄;骨骼载荷力、长骨扭转角、骨骼冲击韧性显著低于对照组。
3.锌、铜对实验性钼中毒绵羊的保护作用与机理研究
实验选择健康小尾寒羊20只,随机分为5组,每组4只,分别口服钼、铜和锌[mg/(kg·d)],Ⅰ组30mg钼、Ⅱ组30mg钼+15mg铜、Ⅲ组30mg钼+15mg锌、Ⅳ组30mg钼+15mg铜+15mg锌,Ⅴ组口服无离子水作为健康对照组,实验期90d。定期观察临床症状、病理及组织学变化,定期采血,用全自动血液细胞分析仪检测血液学指标的改变;用自动生化分析仪检测血清中CK、AST、ALT、LDH、HBDH、ALP、SOD等酶的活性;定期测定血液T、B淋巴细胞百分率及其绝对值和血清α、γ球蛋白含量;试验结束检查骨骼形态学改变和生物力学参数,用原子吸收法测定肝脏和肾脏钼、锌、铜含量。结果表明:
口服30mg钼实验羊表现不同程度的中毒症状和病理变化,主要以中毒性的心肌损伤和心肌肥大为特征,骨骼肌萎缩,肝细胞核染色质凝聚,线粒体肿胀等变化。补充15mg铜绵羊组织病理学变化明显减轻。补充15mg锌绵羊肝脏、心脏线粒体的损害程度减轻。补充15mg锌和铜组织病理变化不明显。说明30mg钼已构成对绵羊的组织损害,15mg铜或锌对绵羊的钼损害有一定的保护作用,二者同时补充对钼的毒性有明显的颉抗作用。
试验绵羊口服30mg钼,RBC、HB、PCV、MCH、WBC等血液学指标明显下降;CK、AST、ALT、LDH、HBDH、ALP等酶的活性显著升高,SOD的活性显著降低,其中以15~45d酶的活性变化最明显。T、B淋巴细胞百分率下降,其中B淋巴细胞更明显。血清γ球蛋白和α-球蛋白含量有一定变化。补充15mg铜,减小了血液学指标下降程度,铜对血清α-球蛋白含量影响不显著,对酶活性的改变有一定的保护作用;铜对钼中毒绵羊免疫功能的保护作用不明显.补充15mg锌对血液学指标和血清γ球蛋白含量影响较小;锌对钼中毒绵羊免疫学指标有一定的保护作用。15mg锌或铜对钼所致的超氧化物歧化酶的活性下降有一定影响,但不足于抵抗钼所致的改变。补充15mg锌和15mg铜,绵羊血液学指标无显著改变;对钼损害的酶的活性作用效果优于单因子锌、铜的作用,有较好的保护作用,对绵羊免疫损害也有很好的保护效果。
30mg钼能使绵羊骨载荷明显降低,骨皮质变薄,抗扭转能力及冲击韧性降低。补充15mg铜后,骨的冲击韧性值明显增加,但对骨骼密度、股骨载荷、扭转角影响不显著,说明15mg的铜对30mg钼所致的骨学变化有一定的保护作用;15mg锌对30mg钼所致骨骼重量和扭转韧性比补铜组作用好,但冲击韧性比补铜组差;在30mg钼的条件下,补充15mg铜和15mg锌,在提高冲击韧性和载荷方面,明显好于单纯补充铜或锌。
肾锌含量组间比较均差异极显著。说明30mg钼可使肝脏、肾脏钼含量显著增加,肾脏钼含量高于肝脏,肝锌、铜含量均显著降低。锌对肝脏钼有很好的颉抗作用;锌在肝、肾均有明显的蓄积作用,铜、锌使肾钼含量降低,且总蓄积量也减少,有效地降低了钼、铜在组织中的蓄积。
4.绵羊钼中毒防治试验实验
选择健康的育成羊48只,随机分成两组,每组羊24只,试验组在盐砖(组成:糖、蜂蜜35%,糠麸44%,尿素10%,硅酸盐水泥8%,食盐1%,骨粉1%,适量维生素)的基础上增加5%的锌和5%的铜。结果表明:试验组比对照组平均增重2.2 kg,差异显著;剪毛量增加0.19kg。试验组每只羊比对照组多增加收入26元,经济效益明显。将锌铜制剂直接喷洒土壤和牧草中,投资少,能耗低,社会效益高。本文还进行了绵羊钼中毒典型病例的诊断与治疗试验,效果明显。