体外受精和胚胎培养在医学、生物学等相关领域已得到广泛应用,但体外受精和胚胎培养体系仍有待于进一步完善。为了建立更为简单、高效的胚胎体外受精和胚胎培养体系,提高体外发育的胚胎质量。本研究比较了不同培养体系对昆明小鼠胚胎体外发育的影响,观察了不同品系的小鼠精子对体外受精和胚胎发育的影响,并运用共培养对胚胎体外培养体系进行优化;此外,还着重研究了雌激素对小鼠早期胚胎发育的影响。 实验一:对了昆明小鼠体外受精和早期胚胎体外培养的研究结果表明,mKSOM培养液能很好支持昆明小鼠合子体外发育至囊胚;采用B6D2F1(C57BL/6×DBA/2)小鼠的精子进行体外受精,其受精率、囊胚率和囊胚总细胞数显著高于昆明小鼠(KM)的精子。 实验二:采用小鼠子宫上皮细胞与胚胎共培养,观察了共培养对小鼠早期胚胎体外发育的影响。结果表明,胚胎共培养明显促进了体外受精后小鼠胚胎的卵裂、孵化,同时囊胚总细胞数也有显著提高。 实验三:采用RT-PCR和免疫细胞化学方法检测了不同时期小鼠胚胎雌激素受体α(ERα)的表达,并研究了雌激素对小鼠早期胚胎体外发育的影响。结果表明,早期的小鼠胚胎就有ERα的表达,雌激素对早期胚胎发育的调节需要上皮细胞的参与。 综上所述,该研究建立了更为稳定、高效的昆明小鼠体外受精及胚胎体外培养体系,同时表明雌激素对早期胚胎发育的调节需要上皮细胞的参与。