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沉香为瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属Aquilaria植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含树脂的木材,也称国产沉香,味辛、苦,性微温,具有行气止痛、温中止呕、纳气平喘等功效,用于治疗胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急等。虽然目前国内外学者对沉香化学成分进行了大量的研究,但是对其药理活性研究很少,尤其是沉香中特征性化学成分2-(2-苯乙基)色酮类成分的生物活性至今尚不明确。课题组前期采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导BV-2小胶质细胞活化模型,对沉香95%乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯萃取部位进行了活性筛选,发现二者能够明显抑制LPS诱导BV-2小胶质细胞释放一氧化氮(NO)。为阐明其药效物质基础,本课题以抑制BV-2小胶质细胞活化活性为导向,结合LC-MS/MS液质联用技术,对沉香的活性部位进行了系统的化学成分研究,并采用LPS诱导的BV-2小胶质细胞活化模型对分离得到的部分单体化合物进行活性筛选。取得了以下主要研究结果:一、对白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg来源的沉香化学成分和药理活性的国内外相关研究文献进行了查阅和综述。文献研究表明,沉香主要含倍半萜类、2-(2-苯乙基)色酮类、芳香族类、黄酮类等化学成分;药理活性主要包含镇痛、抗菌、抗炎、神经保护、细胞毒等。二、本论文以抑制BV-2小胶质细胞活化活性为导向,结合LC-MS/MS液质联用技术对沉香95%乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯活性部位进行了系统的化学成分研究,利用硅胶、Sephadex LH-20、ODS和半制备HPLC等多种色谱分离方法和波谱分析技术,结合理化数据,共分离、鉴定了 59个化合物。具体包括倍半萜类化合物26个:(+)-9β-hydroxy-selina-4,11-dien-12-al(1)、(+)-8α-hydroxy-selina-3,11-dien-14-al(2)、(+)-8α-hydroxyeudesma-3,11(13)-dien-14-al(3)、(+)-eudesma-3,11(13)-dien-8α,9β-diol(4)、(+)-eudesma-4(14),11(13)-dien-8α,9β-diol(5)、(4R,5R,7S,9S,10S)-(-)-eudesma-11(13)-en4,9-diol(6)、(+)-9β,10β-epoxyeremophila-11(13)-en(7)、(+)-11-hydroxyvalenc-1(10),8-dien-2-one(8)、(-)-eremophila-9-en-8β,11-diol(9)、12,15-dioxo-selina-4,11-dine(26)、12-hydroxy-4(5),11(13)-eudesmadien-15-al(27)、(7S,9S,1 0S)-(+)-9-hydroxyselina-4,11-dien-14-al(28)、(5S,7S,9S,10S)-(+)-9-hydroxyeudesma-3,11(13)-dien-12-methylester(29)、(5S,7S,9S,10S)-(+)-9-hydroxyselina-3,11-dien-12-al(30)、(4αβ,7β,8αβ)-3,4,4α,5,6,7,8,8α-octahydro-7-[1-(hydroxymethyl)ethenyl]-4α-methylnaphthalene-1-carboxaldehyde(31)、selin-11-en-4α-ol(32)、5-desoxylongilobol(33)、eudesma-4-en-11,15-diol(34)、白木香酸(35)、(lβ,4αβ,7β,8αβ)-octahydro-7-[1-(hydroxymethyl)ethenyl]-1,8α-dimethylnaphthalen-4a(2H)-ol(36)、2-[(2β,4αβ,8β,8αβ)-decahydro-4α-hydroxy-8,8α-dimethylnaphthalen-2-yl]prop-2-enal(37)、-11-hydroxyvalenc-1(10)-en-2-one(38)、15-羟基-菖蒲烯酮(39)、14-羟基-α-蛇麻烯(40)、白木香醛(41)和(4R,5R,7R)-1(10)-spirovetiven-11-ol-2-one(42);简单2-(2-苯乙基)色酮类11个:2-(2-苯乙基)色酮(43)、8-氯-6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮(44)、6,3’-二甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(45)、7-羟基-2-(2-苯乙基)色酮(46)、5-羟基-6-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(47)、6-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(48)、7-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(49)、4’-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(50)、6,7-二甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(51)、6,7-二甲氧基-(2-羟基-2-苯乙基)色酮(52)和6-羟基-7-甲氧基-2-[2-(3’-羟基-4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(53);四氢 2-(2-苯乙基)色酮类 4 个:oxidoagarochromone C(54)、rel-(1αR,2R,3R,7βS)-1α,2,3,7β-tetrahydro-2,3-dihydroxy-5-[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]-7H-oxireno[f][1]benzopyran-7-one(55)、aquilarone C(56)和(5S,6R,7R,8S)-4’-methoxy-2-(2-phenylethyl)-5e’,6e’,7e’,8e’-tetrahydroxy-5,6,7,8-tetrahydrochromone(57);2-(2-苯乙基)色酮二聚体 1 6个:沉香双色酮 A-P(10-25);其他类化合物 2 个:1-hydroxy-1,5-diphenylpentan-3-one(58)和β-谷甾醇(59)。其中新化合物25个(化合物1-25),化合物27、32-33和38-40为瑞香科植物中首次报道,化合物26、31、34、36-37、42和58为白木香中首次报道。三、采用脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞释放一氧化氮(NO)模型对分离得到的部分单体化合物进行了体外活性筛选。结果表明(+)-9β,10β-epoxyeremophila-11(13)-en(7)、12,15-dioxo-selina-4,11-dine(26)、(5S,7S,9S,10S)-(+)-9-hydroxyselina-3,1 1-dien-12-al(30)、(4αβ,7β,8αβ)-3,4,4α,5,6,7,8,8α-octahydro-7-[1-(hydroxymethyl)ethenyl]-4α-methylnaphthalene-1-carboxaldehyde(31)和 2-[(2β,4αβ,8β,8αβ)-decahydro-4α-hydroxy-8,8α-dimethylnaphthalen-2-yl]prop-2-enal(37)能不同程度抑制脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞释放NO,具有潜在的抗炎活性。