论文部分内容阅读
运动性疲劳是一种常见的亚健康状态,严重威胁人们的生活质量和工作效率。蓝莓浓缩汁含丰富的生物活性成分,具明显的保健功能,且克服了传统抗疲劳药物的毒副作用。本实验对蓝莓浓缩汁的抗运动性疲劳效果进行评价,并围绕多巴胺能通路对其抗疲劳的神经机制进行初步探究。(1)本实验使用三周强制游泳的方法建立小鼠运动性疲劳模型,通过检测力竭游泳时间、生化指标确立疲劳模型。结果表明游泳一周后的小鼠力竭游泳时间极显著降低,且该变化能持续至第三周。对游泳三周的小鼠生化指标进行检测,发现游泳组小鼠的乳酸(Blood lactic acid,BLA)和血清尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)含量显著升高,而肝糖原(Liver glycogen,LG)和肌糖原(Muscle glycogen,MG)含量显著降低。(2)本实验根据冷冻浓缩的原理进行蓝莓浓缩汁的制备并对其抗疲劳效果进行研究。分析蓝莓浓缩汁的可见光吸收图谱,发现其在520 nm处有最大吸收峰,在此基础上利用pH示差法,发现4级浓缩汁浓缩效果最好,花青素含量达到5.74±0.03 mg/mL。利用建模成功的小鼠,以蓝莓浓缩汁低、高剂量组作为实验组,红牛和咖啡因作为阳性对照组探究蓝莓浓缩汁的抗疲劳效果。发现蓝莓浓缩汁可显著延长小鼠的力竭游泳时间,降低BLA和BUN的含量,增加LG和MG的含量。本研究又对疲劳小鼠的脏器进行HE染色分析,发现运动疲劳小鼠的心肌纤维、肝脏细胞和肾小管上皮细胞形态均发生明显的改变,蓝莓浓缩汁可明显改善运动性疲劳产生的影响,维持正常的细胞形态。(3)本实验围绕纹状体中的多巴胺能通路,探究蓝莓浓缩汁抗运动性疲劳的神经通路机制。首先,对小鼠纹状体神经元进行苏木素-伊红染色分析,发现运动性疲劳小鼠神经元细胞形态变圆,蓝莓浓缩汁组小鼠神经元与模型组相比形态完整,排列紧密。为探究蓝莓汁抗疲劳的机制,对影响突触间多巴胺含量的酪氨酸羟化酶(Tryrosine hydroxylase,TH)和多巴胺转运体(Dopamine transporters,DAT)蛋白进行免疫荧光和Western blot分析,结果显示与正常小鼠相比,疲劳模型小鼠TH和DAT的表达均显著下调,而灌胃蓝莓浓缩汁小鼠的表达均显著上调;最后对纹状体和皮层中TH和DAT的mRNA进行检测,结果与蛋白水平变化一致。说明蓝莓浓缩汁可维持运动性疲劳小鼠神经元的正常形态,提高控制多巴胺合成和转运的关键蛋白TH和DAT的表达。结果表明,持续强制游泳能建立稳定的运动性疲劳模型,蓝莓浓缩汁具有明显抗疲劳效果,其抗运动性疲劳的神经机制与维持多巴胺能通路中多巴胺的合成和转运相关。