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在我国,油茶具有悠久的栽培历史,其种子主要被用于生产油茶籽油和茶皂素,并有大量研究表明其生物活性和药理功能。炎症可以引起关节炎、心脑血管疾病、老年痴呆、癌症等多种疾病,是被广泛关注的公共卫生问题。本研究通过对油茶籽主要活性成分黄酮苷和皂素的分离制备研究,及其抗炎效果和机制的研究,取得了以下研究成果:1.回流提取、溶剂萃取联合半制备液相色谱分离制备油茶籽中的黄酮苷和皂素,得到四种黄酮苷和五种皂素,分别为山奈酚-3-O-[2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6-O-α-L-吡喃鼠李糖基]-p-D-吡喃葡萄糖苷,山奈酚-3-O-p-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-7-O-a-L-吡喃鼠李糖苷,山奈酚-3-O-[2-O-β-D-吡喃木糖基-6-O-a-L-吡喃鼠李糖基]-p-D-吡喃葡萄糖苷和山奈酚-3-O-a-L--吡喃鼠李糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷;山茶皂素B1/B2或茶皂素H1、茶皂素F1、阿萨姆皂素F、阿萨姆皂素A/E或茶皂素G1和茶皂素A1。半制备HPLC分离黄酮苷和皂素的最优条件为:流动相A相(95%水+5%冰乙酸):B相(乙腈)=65%:35%分离制得黄酮苷部分;流动相A相(95%水+5%冰乙酸):B相(乙腈)=20%:80%分离制得皂素部分,流速为8ml/min,最大上样量为50mg。每次分离耗时1h以内,可制得纯度为98.58%的黄酮苷和75.01%的皂素,并建立了UPLC-MS鉴定黄酮苷和皂素的方法分别仅需10min,15min.2.建立脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)诱导炎症的细胞模型,检测其一氧化氮(NO)积累量,发现黄酮苷和皂素均可显著抑制NO在细胞内的产量,说明两者均具有较好的抗炎效果。随之,检测了细胞内重要的促炎细胞因子:肿瘤坏死因子-a (Tumor necrosis factor, TNF-a)、诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase, iNOS)、环氧合酶-2(Cycloxygenase-2,COX-2)和巨噬细胞炎症蛋白-1α (Macrophage inflammatory protein-1α, MIP-1α)在mRNA水平和iNOS、COX-2在蛋白水平的表达量,发现黄酮苷和皂素均可抑制其表达,说明黄酮苷和皂素抗炎效果的发挥与抑制这些细胞因子的表达有关。3.通过检测LPS诱导炎症的细胞模型中NO的积累量,发现油茶籽毛油和成品油均有较好的抗炎效果,由促炎因子TNF-α、INOS、COX-2和MIP-1α表达量的测定结果可知,油茶籽油的抗炎效果与抑制这些细胞因子的表达有关,这与油茶籽中黄酮苷和皂素的研究结果一致。并且,相同浓度的毛油与成品油相比,毛油的抗炎效果优于成品油。4.优化了测定油茶籽油挥发性成分的固相微萃取-气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS),其最佳前处理方式是萃取温度50℃,萃取时间60min,经GC-MS分析后毛油和成品油分别确定了31种和24种挥发性成分,并有16种共有成分,分别占两者挥发性成分总量的54.98%和70.23%。从挥发性成分的种类看,两种油茶籽油的烃类、醇类和酯类成分的相对含量差异不大,但其组成有所不同;而醛类、酮类、酸类等挥发性成分的相对含量差异较大,说明毛油的精制过程对其挥发性成分的种类和数量有较大影响。总之,本实验以油茶籽的活性成分为研究对象,分离制得油茶籽中的黄酮苷和皂素,并用超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS)鉴定其组成和结构。然后通过LPS诱导建立RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型,研究了油茶籽中总黄酮苷、总皂素及油茶籽油的抗炎效果,进一步测定炎症模型中TNF-α、iNOS.COX-2和MIP-1α的基因和蛋白表达量明确其抗炎的分子机理。此外,还优化了油茶籽油挥发性成分的测定方法,确定了其挥发性成分的组成和特点。