本研究取蒙古羊耳缘组织块,14 日胚胎北京鸭,8 日胚胎清远麻鸡、藏鸡和狼山鸡,采用组织块贴壁培养法,成功构建并冷冻了五个畜禽品种遗传资源成纤维细胞系。细胞冻存代数在5 代以内,冻存密度为3×106个细胞/ml,每个品种的样本含量在30～60 个之间,保存管数达150～180 支,根据建系要求,对成纤维细胞的生物学性状进行分析,所得结果如下: 1 培养细胞形态为典型的成纤维状,为梭形或不规则三角形,细胞在生长时呈放射状、火焰状或旋涡状走形,清远麻鸡的细胞形态与藏鸡和狼山鸡相比,胞质向外伸出的突起较多,且较短。可作为该品种区别于其它品种的显著特征。2 生长曲线结果显示,五种动物的生长曲线均呈“S”型,细胞经历了潜伏期、指数生长期和停滞期。3 细胞冻存前后存活率结果表明,五种动物细胞在冷冻和复苏过程中可能受到一定的损伤,复苏后存活率有所下降,但均保持在90%以上。4 微生物检测结果呈阴性,表明细胞未受到细菌、真菌、病毒及支原体污染。5 染色体核型分析结果为, 蒙古羊的二倍体染色体数目2n=54,北京鸭2n =78,清远麻鸡、藏鸡、狼山鸡2n=78±。五种动物细胞染色体均能保持二倍体性状,遗传性能稳定,可以作为物种鉴别的依据。6 LDH 和MDH 同工酶酶谱结果表明,各品种之间的同工酶谱带存在显著差异,因此可判断没有受到细胞系间的交叉污染。7 绿色荧光蛋白基因在培养细胞中的表达表明Lipofectin 能有效介导重组质粒pEGFP-N3 转染成纤维细胞,转染率与细胞生长汇合程度、脂质体包被质粒的浓度比例及转染时间直接相关。本实验中当细胞汇合度达70～80%时,用2μl 脂质体介导1.5μg 重组质粒转染10h 即可获得较满意的转染效率。转染率分别为蒙古羊52%、北京鸭23%、清远麻鸡33%、藏鸡20%、狼山鸡19%。本实验构建的成纤维细胞系符合ATCC 要求的细胞系鉴定项目,不仅使畜禽遗传资源在细胞水平永久保存下来,而且为分子生物学研究提供宝贵材料。