【摘 要】
:
本研究取蒙古羊耳缘组织块,14 日胚胎北京鸭,8 日胚胎清远麻鸡、藏鸡和狼山鸡,采用组织块贴壁培养法,成功构建并冷冻了五个畜禽品种遗传资源成纤维细胞系。细胞冻存代数在5
论文部分内容阅读
本研究取蒙古羊耳缘组织块,14 日胚胎北京鸭,8 日胚胎清远麻鸡、藏鸡和狼山鸡,采用组织块贴壁培养法,成功构建并冷冻了五个畜禽品种遗传资源成纤维细胞系。细胞冻存代数在5 代以内,冻存密度为3×106个细胞/ml,每个品种的样本含量在30~60 个之间,保存管数达150~180 支,根据建系要求,对成纤维细胞的生物学性状进行分析,所得结果如下: 1 培养细胞形态为典型的成纤维状,为梭形或不规则三角形,细胞在生长时呈放射状、火焰状或旋涡状走形,清远麻鸡的细胞形态与藏鸡和狼山鸡相比,胞质向外伸出的突起较多,且较短。可作为该品种区别于其它品种的显著特征。2 生长曲线结果显示,五种动物的生长曲线均呈“S”型,细胞经历了潜伏期、指数生长期和停滞期。3 细胞冻存前后存活率结果表明,五种动物细胞在冷冻和复苏过程中可能受到一定的损伤,复苏后存活率有所下降,但均保持在90%以上。4 微生物检测结果呈阴性,表明细胞未受到细菌、真菌、病毒及支原体污染。5 染色体核型分析结果为, 蒙古羊的二倍体染色体数目2n=54,北京鸭2n =78,清远麻鸡、藏鸡、狼山鸡2n=78±。五种动物细胞染色体均能保持二倍体性状,遗传性能稳定,可以作为物种鉴别的依据。6 LDH 和MDH 同工酶酶谱结果表明,各品种之间的同工酶谱带存在显著差异,因此可判断没有受到细胞系间的交叉污染。7 绿色荧光蛋白基因在培养细胞中的表达表明Lipofectin 能有效介导重组质粒pEGFP-N3 转染成纤维细胞,转染率与细胞生长汇合程度、脂质体包被质粒的浓度比例及转染时间直接相关。本实验中当细胞汇合度达70~80%时,用2μl 脂质体介导1.5μg 重组质粒转染10h 即可获得较满意的转染效率。转染率分别为蒙古羊52%、北京鸭23%、清远麻鸡33%、藏鸡20%、狼山鸡19%。本实验构建的成纤维细胞系符合ATCC 要求的细胞系鉴定项目,不仅使畜禽遗传资源在细胞水平永久保存下来,而且为分子生物学研究提供宝贵材料。
其他文献
蒙古冰草(AgropyronmongolicumKeng)是一种分布广、抗逆性强的优良饲用禾草.它不仅具有重要的经济价值,而且具有重要生态价值和遗传价值.该文以采自内蒙古锡林郭勒盟西乌旗、
本文研究了甘草盖度和地上鲜重与地下干重的关系,产量与盖度的关系可用方程Y=aX~b来拟合,与地上鲜重的关系可用方程Y=a+bX来拟合.通过盖度与地上鲜重的综合分析,建立了产量预
摘要:有载分接开关在运行过程中主要用于调节变压器输出电压,其特点是在变压器不中断负载电流的前提下改变变压器的匝数比。在长时间的使用过程中,由于各种原因,包括操作不正确、电动操作回路异常或故障、本体异常或故障,都可能导致分接开关无法动作、误动或拒动等。将有载分接开关在运行中可能出现的异常或故障,通过分析故障的现象,导致故障的可能的原因,进而列出处理的方法。 关键词:变压器 有载分接开关 异常故障
采用胸腺核苷、氨甲蝶呤以及5-溴尿嘧啶核苷同步化外周血淋巴细胞培养法,以染色体核型,G-、C-带和Ag-NORs 技术,对德国肉用美利奴、南非肉用美利奴、道赛特、萨福克、夏洛莱
对100头苏太肥育猪进行屠宰测定,测定指标包括:胴体重、背膘厚、嫩度、大理石纹、系水力、pH值和肌内脂含量,其统计分析结果表明:苏太猪背膘较薄,2.58±0.57cm,大理石纹评分优良3.2
植物在控制水土流失、增加边坡稳定性以及改善生态环境方面起着重要的作用,植物根-土之间的摩擦力以及根系自身的强度可以增加土体的抗剪强度,提高坡体稳定性。本文针对草本
该研究根据GenBank中注册的MSTN基因序列设计引物,采用RT-PCR方法成功地从鸡胚、鹅胚及乳猪肌肉中扩增到MSTN全基因的cDNA片段,将此3个不同来源的MSTN基因的cDNA片段分别克隆
天蓝苜蓿是一种一年生或越年生的野生苜蓿种,在我国野生种质资源丰富,分布广泛,适应性强,耐寒、耐旱、耐瘠薄,生长发育快,曾作为短期绿肥种植。 野外调查表明,野生条件下,天蓝苜蓿
随着畜牧养殖业的迅猛发展,饲料资源短缺问题一直影响着畜牧业的可持续发展,已成为我国畜牧业面临的一大挑战,因此,根据不同菲常规原料的营养特性和养殖动物生理特点,科学利用新饲
冰草属(Agropyron Gaertn.)牧草是温带上重要的牧草,不仅具较高的饲草价值,也是干旱、半干旱地区改良草场和建设人工草地的适宜草种。利用基因工程对冰草进行遗传改良具有重要实践意义。因此建立一种有效的、稳定的再生系统和转化系统已成为冰草分子生物学研究和基因工程的关键技术。虽然已有一些冰草组培再生的研究报道,但多集中于胚培养等,冰草遗传转化系统仍存在许多问题需要进行深入的研究。本研究探索