论文部分内容阅读
目的筛选桥本甲状腺炎(Hshimoto’s thyroiditis,HT)合并甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中差异表达的miRNA,并进行临床验证。通过生物学软件预测其靶基因,初步探索其作用机制。方法将3例经病理确认的桥本合并PTC的新鲜组织标本进行总RNA提取,采用基因芯片技术进行miRNA筛查,以3例良性结节性甲状腺肿组织为正常对照。采用荧光定量PCR验证芯片筛查结果。通过多个生物学软件进行miRNA靶基因预测,构建调控网络图,并进一步行mRNA芯片筛查所有预测靶基因的表达差异。收集桥本合并PTC、甲状腺滤泡状癌(Follicular thyroid carcinoma,FTC)、甲状腺髓样癌(Mudullary thyroid carcinoma,MTC)组织各10例,采用荧光定量PCR检测各组标本miR-130a表达,对芯片结果进行临床验证,分析以上三种病理类型IniR-130a表达差异。结果miRNA芯片结果显示,与对照组相比,桥本合并PTC组织中miR-130a表达量呈5倍下调(P=0.035)。荧光定量PCR结果显示桥本合并PTC组miR-130a表达量下调2.25倍,与芯片结果一致。通过生物学软件预测WNT10A为miR-130a的靶基因。mRNA芯片结果显示,与对照组相比,桥本合并PTC组织中WNT10A基因表达上调16.9倍(P<0.001)。荧光定量PCR结果显示桥本合并PTC组WNT10A基因表达上调17.8倍,与芯片结果一致。在HT合并PTC、甲状腺滤泡状癌、甲状腺髓样癌及结节性甲状腺肿组织中进行验证,结果显示：各实验组miR-130a表达均下调。其中合并桥本的PTC组织miR-130a表达量为对照组的0.44倍,与之前的PCR验证结果一致。MTC、FTC中miR-130a表达量分别为对照组的0.09倍、0.15倍,以上差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论桥本合并PTC组织中miR-130a表达下调,其预测靶基因WNT10A表达上调,二者呈负调控趋势。miR-130a可能通过调控WNT10A基因参与桥本合并PTC的发病机制。miR-130a在FTC、MTC中表达均下调,且预后越差的病理类型中miR-130a表达水平越低,提示miR-130a的异常下调参与多种类型甲状腺癌的发生,且可能与恶性程度相关。