密云水库库滨区土壤和底泥中氨氧化微生物的群落特征及与环境因子的响应关系

来源 :首都师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:RIshan
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硝化作用是氮循环中的关键步骤,氨氧化细菌(ammonia-oxidizing bacteria,AOB)和氨氧化古菌(ammonia-oxidizing archaea,AOA)是该过程的重要执行者。本文通过研究密云水库水陆交错带底泥沉积物和土壤样品中AOB和AOA的多样性、丰度及群落结构,并确定关键环境影响因子。通过室内模拟实验,进一步确定有机碳和铵盐对AOB和AOA的丰度、多样性及群落结构的影响。研究结果:(1)通过末端限制性片段长度多态性分析(Terminal-Restriction Fragment Length Polymorphism,T-RFLP)技术,AOB和AOA在底泥沉积物样品中多样性均较低,AOB在水陆交错带土壤和农田土壤中多样性相对较高,AOA在陆相区域非农田土壤多样性最高。在底泥沉积物中,AOA的多样性低于AOB而在农田土壤中,AOA多样性高于AOB;(2)通过实时荧光定量PCR技术(leal-time fluorescent quantitative PCR,简称QPCR)可得,在农田土壤中,AOB丰度最高,AOA丰度最低,在其他样点AOA丰度均高于AOB。在底泥沉积物中,AOA的丰度显著高于AOB,且AOA/AOB比率在底泥沉积物中最高;(3)通过皮尔森相关系数和lDA(Redundancy Analysis)分析表明,NH4+-N、NO3--N和TOC是影响AOB优势物种的主要影响因子,pH和TOC是AOA群落结构的最主要影响因子。AOA和AOB丰度与环境因子没有显著相关性。而AOB多样性与pH、TN呈正相关关系,AOA多样性与硝酸盐、铵盐呈负相关关系;(4)通过克隆实验分析可得,样品中获得的AOA序列没有发现已知纯菌。样品中的AOB有少量的属于Nitrosopira-like种属;(5)通过室内模拟有机碳实验发现,有机碳的施用能够增加AOA和AOB的群落丰度,但却显著的减小AOB和AOA的群落多样性,并且改变两者的群落结构。获得的AOA序列没有发现纯菌,仅在添加葡萄糖的土壤样品中,发现与Nitrosospira-like相似的AOB的纯菌;(6)通过室内模拟铵盐实验分析得出,在相同浓度的铵盐样品中,AOB的丰度随时间变化呈现先增后减的趋势,AOA的变化趋势是逐渐增多,这说明AOA适宜在低浓度铵盐环境中生存。本文研究对于揭示水陆交错带氮循环过程具有重要意义。
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