【摘 要】
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戊型肝炎病毒(HEV)是经肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒.目前对其生物学特性、致病性、流行病学、诊断方法及疫苗等已进行了深入广泛的研究,但仍有很多尚未解决的问题.HEV ORF2
【出 处】
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中国药品生物制品检定所 中国食品药品检定研究院
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戊型肝炎病毒(HEV)是经肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒.目前对其生物学特性、致病性、流行病学、诊断方法及疫苗等已进行了深入广泛的研究,但仍有很多尚未解决的问题.HEV ORF2区段是公认的结构基因编码区,ORF3也含有显示高抗原活性的位点.目前的诊断试剂和疫苗多以其为基础进行研制,但是对ORF1上的抗原决定区却少有资料探讨;已有资料显示,HEV基因型间存在较大的变异性,但至今商售的诊断试剂均由Ⅰ型及Ⅱ型HEV基因表达产物制成.该文利用基因工程技术克隆并表达了HEV ORF1 RDRP部分区段基因,并对表达产物作了初步纯化和抗原性的初步分析;另外,该研究表达了Ⅰ型HEVORF2 C端及ORF3基因,纯化后建立ELISA法检测了抗-HEV IgG、IgM国家参考品及91例临床血清,并与Ⅳ型HEV相应区段检测结果进行了分析比较.该研究应用RT-PCR技术,从HEV患者粪便中扩增ORF1 RDRP区长度分别为975bp和659bp的两个相互重叠的片段,将其克隆后测序得到总长度为1483bp的基因片段.与有代表性的几个已知HEV株序列比较,核苷酸和氨基酸同源性分别为74~84﹪及85~96﹪,系统进化分析表明为Ⅳ型HEV.
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