Fbxl10促进肺腺癌细胞增殖和迁移的生物学作用研究

来源 :蚌埠医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nicolewyy
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目的:探讨去甲基化酶Fbxl10对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法:体外培养肺腺癌细胞株H1299和A549,设立空白对照组(Ctrl组,未作任何处理的细胞),阴性质粒对照组(NC组,negative control of Fbxl10),过表达组(Fbxl10OE组,overexpression of Fbxl10)和干扰组(si Fbxl10组,small interfering RNA of Fbxl10),均采用脂质体法转染至肺腺癌H1299细胞株(或A549细胞株);分别利用细胞克隆形成实验及MTT实验检测Fbxl10基因对肺腺癌细胞株增殖的影响;运用细胞划痕愈合实验和Transwell迁移和侵袭实验检测Fbxl10基因对肺腺癌细胞株迁移和侵袭能力的作用;运用RT-PCR和Western blotting技术检测转染后肺腺癌细胞株Fbxl10和PI3K的m RNA水平以及相关蛋白的表达情况。结果:通过质粒瞬时转染(脂质体法),成功构建Fbxl10基因过表达和敲低表达的肺腺癌H1299细胞株(或A549细胞株);在细胞克隆实验、MTT实验、细胞划痕愈合实验、和Transwell迁移和侵袭实验中,与NC组比较,在肺腺癌H1299细胞株(或A549细胞株)中过表达Fbxl10,能促进肺癌细胞的增殖、迁移能力(P<0.05);RT-PCR结果显示,过表达Fbxl10时,Fbxl10 m RNA与PI3K m RNA的过表达组均高于NC组(P<0.05);Western blotting结果显示,在H1299细胞中,过表达Fbxl10时,Fbxl10蛋白与PI3K蛋白的表达也明显高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在肺腺癌细胞中,Fbxl10与PI3K之间存在着密切联系,Fbxl10高表达时,也伴随着PI3K的高表达;Fbxl10过表达能促进肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力;敲低其表达时,能抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
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