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荧光素酶免疫共沉淀系统（Luciferase immunoprecipitation system，LIPS）是通过在哺乳动物细胞中将荧光素酶与抗原进行融合表达，以测定血清中未知抗体的检测技术。将抗原与荧光素酶融合表达，血清中抗体与抗原特异性结合，抗体再与大颗粒物质proteinA/G plus agarose结合，三者形成一个复合物，通过分析复合物上的荧光素酶与底物作用时是否发出荧光，以检测血清中的抗体。LIPS检测系统选择在哺乳动物细胞表达抗原，抗原会形成空间构象，可以提高检测效率，同时该系统采用的抗原不需要经过纯化，简化了实验步骤。蜱传脑炎病毒、登革病毒属于黄病毒科黄病毒属，它们能在节肢动物（如蚊、蜱、白蛉等）体内增殖，可以通过昆虫叮咬传染给脊椎动物或人，引起自然疫源性疾病，严重威胁人民的健康。研究发现，该类病毒的包膜蛋白Ⅲ区可以诱导中和抗体的产生，具有亚型特异性。肾综合症出血热病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属，至少有22个血清型/基因型，我国流行有汉滩型、汉城型，可引起肾综合症出血热症状，每年约有5万人发病。该病毒基因组是有包膜的分节段的负链RNA，包括L、M、S共3个片段，分别编码L聚合酶蛋白、G1和G2糖蛋白、核蛋白，其中S基因编码的核蛋白具有型特异性抗原决定簇。本课题分别利用大肠杆菌BL21(DE3)和哺乳动物细胞COS7进行了蜱传脑炎病毒包膜蛋白Ⅲ区、登革病毒1和登革病毒3包膜蛋白Ⅲ区、肾综合征出血热病毒核蛋白（分段表达PN和PC）的原核和真核细胞表达，除PC蛋白外，所表达的蛋白均具有抗原性。在此基础上，建立并优化了LIPS检测方法，并用以原核表达抗原为包被抗原的Array-ELISA方法进行检测效果比较。用所建立的LIPS方法对53份肾综合征出血热血清标本进行检测，阳性检出率为86.8%，Array-ELISA方法的阳性检出率为75.5%。选择TBE-EDⅢ蛋白，检测50份蜱传脑炎临床血清标本，LIPS方法从48份阳性标本检出38份，灵敏度为79.2%，Array-ELISA方法从50份血清标本检出29份，灵敏度为60.4%。本课题应用真核细胞表达的抗原，建立并优化了可用于蜱传脑炎病毒、肾综合症出血热病毒抗体检测的LIPS方法，与采用原核表达抗原的Array-ELISA检测技术进行比较，证实LIPS方法检测灵敏度高于Array-ELISA技术，可以提高患者血清抗体的检测灵敏度。