B细胞活化因子与系统性红斑狼疮关联性的研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:nixofnj
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为探讨由B细胞活化因子(BAFF)所介导的B细胞激活对系统性红斑狼疮(SLE)的致病机理,寻找能从转录水平阻断BAFF基因激活的部分细胞因子以治疗SLE;本研究构建了克隆载体pMD18-T-BAFF作为定量模板,基于TaqMan荧光探针技术,建立检测BAFF基因表达水平的实时荧光定量RT-PCR方法;联合自行建立的检测BAFF血清水平酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,研究部分SLE患者的血清BAFF含量与外周血BAFF基因表达水平、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)浓度、和抗双链DNA(ds-DNA)抗体滴度的相关性。并从人BAFF基因上游5’侧翼区-1320~-300bp的片段中,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成5个重组体,转染上述重组体至靶细胞,测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性;加入细胞因子(IL-10、IL-4、IFN-γ、及重组BAFF分子),以测定其对BAFF基因启动子活性的影响。
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