微核实验评价自制无铍镍铬烤瓷合金的生物相容性

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目的本研究通过微核实验从毒理学角度来检测烤瓷熔附金属全冠的金属基底材料的生物相容性,从而直接、可靠、客观地评价自制合金材料的致突变性和致癌性,确定其临床应用的安全性;同时对自制无铍镍铬烤瓷合金同进口含铍镍铬烤瓷合金两种金属材料的致突变性和致癌性作比较,找出相对安全的一种镍铬合金材料。为新产品的开发应用提供理论依据。方法将自制镍铬合金1#合金(无铍镍铬烤瓷合金,中科院金属研究所)、2#合金(无铍镍铬烤瓷合金,中科院金属研究所)、3#合金(含铍镍铬烤瓷合金,中科院金属研究所)、4#合金(含铍镍铬烤瓷合金,VeraBond.V美国)制成4cm×2cm×1mm各两个样本,清洗(乙醇,超声波)灭菌后,置于60ml无菌广口瓶中,按金属材料每平方厘米表面积1.3ml的量,浸在浓度为0.154MNaCL(PH为4.8)的介质中,盖严,置于37℃培养箱中5天水浴浸提。实验动物为20±2g健康昆明种小白鼠112只,雌雄各半,按性别、体重随机分成14组,用于微核实验。微核实验:阴性对照组:用0.154M的盐水;阳性对照组:用环磷酰胺40mg/kg;1号合金高剂量组:用1号合金浸提液原液;1号合金中剂量组:用1号合金浸提液原液2倍稀释;1号合金低剂量组:用1号合金浸提液原液4倍稀释;2号合金高、中、低剂量组:高剂量组用2号合金浸提液原液,中、低剂量组的稀释方法同1号合金中、低剂量组;3号合金高、中、低剂量组:高剂量组用3号合金浸提液原液,中、低剂量组的稀释方法同1号合金中、低剂量组;4号合金高、中、低剂量组:高剂量组用4号合金浸提液原液,中、低剂量组的稀释方法同1号合金中、低剂量组。采用腹腔注射法注射,剂量按0.5ml/20g。采用30h给受试物法,取胸骨骨髓与少量小牛血清混匀,在载玻片上制成涂片,每只小鼠制2张涂片。甲醇固定后用Giemsa染色。在100倍油镜下用双盲法观察骨髓嗜多染红细胞(PEC)内的微核率,每张涂片计数500个嗜多染红细胞,每只小鼠计数1000个嗜多染红细胞,观察含有微核的嗜多染红细胞数,并以千分率表示。用统计软件SAS8.12对测量数据进行方差分析。结果1、肉眼观察浸提液:4组浸提液均为无色透明液体,无颜色改变,无沉淀生成,外观看与生理盐水无异。2、微核实验结果:4种样品中的高中低剂量组与阴性对照组相比PEC中微核出现千分率几乎一致,经统计分析其差异无显著性(P>0.05);而样品组与阳性对照组数据相比均有显著差异(P<0.0001)。每种样品不同剂量相比较无显著差异(P>0.05),每两样品组相比较无显著差异(P>0.05)。结论1、自制无铍镍铬烤瓷合金与含铍镍铬烤瓷合金均不具有致畸作用。2、自制无铍镍铬烤瓷合金经微核实验检测无毒性作用,在临床可作为金属烤瓷冠的基底材料。
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