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目的:1)通过分析晚期非小细胞肺癌患者的EGFR突变类型,探讨EGFR外显子19和21基因突变与患者临床病理特征的关系,探索非小细胞肺癌晚期患者口服EGFR-TKIs的疗效是否与EGFR突变类型有关,从而指导临床非小细胞肺癌患者个体化治疗;2)通过高通量测序方法对非小细胞肺癌患者的13种与靶向治疗相关的驱动基因的突变情况进行测序分析,从而分析不同的变异类型与临床病理特征以及预后的关系,为临床精准治疗提供理论依据;3)通过研究小分子蛋白酶抑制剂Oprozomib(OPZ)对肺癌细胞发生发展的作用,探讨第二代蛋白酶体抑制剂Oprozomib对肺癌的抗肿瘤效果以及抗肿瘤作用的初步分子机制。方法:1)收集新疆医科大学附属肿瘤医院组织病理学确证为非小细胞肺癌患者140例,分析患者的临床资料和EGFR突变类型。利用卡方检验和Fisher检验分析患者的临床资料与EGFR突变类型的相关性,除此之外,采用Kaplan-Meier生存分析比较EGFR19号外显子缺失突变和EGFR21号外显子突变的两类非小细胞肺癌患者的中位无进展生存期(mPFS)和中位总生存期(mOS);2)收集新疆医科大学附属肿瘤医院2016年6月至2018年6月69例NSCLC患者样本,对患者样本的EGFR、KRAS、ALK、ROS1、RET、PIK3CA、MET、ERBB2、BRAF、FGFR1、DDR2、NRAS和MAP2K1驱动基因突变情况进行靶向高通量测序分析,结合生物信息学方法鉴定与肿瘤靶向治疗相关的肿瘤驱动基因的突变情况及类型,统计分析及患者预后情况和不同驱动基因突变类型的相关性;3)以EGFR野生型肺癌细胞A549、HOP62、NCI-H226、NCI-H1299和NCI-H1373为对象,通过MTT实验检测不同浓度梯度OPZ对不同基因型的EGFR野生型肺癌细胞增殖的抑制作用,同时利用MTT实验检测OPZ与顺铂药物联合作用不同基因型肺癌细胞,OPZ是否能提高顺铂对肿瘤细胞的杀伤力;通过平板克隆形成实验以及软琼脂克隆形成实验分析OPZ是否可以在体外抑制肺癌细胞贴壁非依赖性生长;使用不同浓度OPZ作用五种不同基因型的肺癌细胞,通过Western Blot实验检测信号通路相关蛋白(p53、p21、PUMA、BAX、NOXA、Caspase-3)等的表达情况。结果:1)EGFR基因突变占总人数的49.29%,其中以21外显子L858R突变(37.68%)和19外显子缺失(24.64%)两种类型的突变为主;EGFR复合突变有16例(23.19%),主要以EGFR敏感突变复合EGFR20外显子T790M突变为主,提示这部分患者对EGFR-TKI可能会产生耐药性;19号外显子缺失突变更倾向于女性、有家族史、肿瘤分期在III-IV期的非小细胞肺癌患者,而21号外显子突变更倾向于男性、腺癌患者、年龄在60岁以上的非小细胞肺癌患者;19外显子突变的非小细胞肺癌患者中位PFS显著长于21外显子突变患者的中位PFS,差异有统计学意义(P<0.05),说明EGFR-TKI药物对19外显子缺失突变的非小细胞肺癌患者有较好的治疗效果;2)对13个药物靶向治疗驱动基因高通量测序,其中EGFR突变在所有驱动基因突变中突变率最高的,其在在女性、腺癌、临床晚期患者中的突变率较高(P<0.05);KRAS基因突变率为11.59%,在年龄大于60岁、男性、有肿瘤家族史、临床分期为III-IV晚期腺癌患者中的发生的可能性较高。ALK基因突突、PIK3CA基因突变、BRAF基因突变、ROS1基因突变均与NSCLC患者临床病理特征无明显相关性(P>0.05);非小细胞肺癌患者中存在双驱动基因突变以及三驱动基因突变,在EGFR突变非小细胞肺癌患者中,EGFR基因伴随其他基因突变如TP53和ERBB2等,患者的PFS明显低于EGFR单基因突变患者,但无生物统计学意义(P>0.05);3)OPZ通过降低cleaved Caspase 3和PARP蛋白表达,稳定p53蛋白及其下游转录靶点,从而使细胞增殖显著降低,促进细胞凋亡。除此之外此,OPZ能提高肺癌细胞对传统化疗药物cisplatin的敏感性,从而提高化疗的效果。结论:1)非小细胞肺癌患者中,EGFR19号外显子缺失突变更倾向于女性、有家族史、肿瘤分期在III-IV期的非小细胞肺癌患者,而21号外显子突变更倾向于男性、腺癌患者、年龄在60岁以上的非小细胞肺癌患者。19外显子突变的非小细胞肺癌患者中位PFS显著长于21外显子突变患者的中位PFS;2)EGFR基因突变伴随其他驱动基因突变可能是患者产生EGFR-TKI耐药性的原因,可以作为预后不良的预测指标之一。对于EGFR敏感基因突变的患者可能需要根据不同的伴随基因突变类型选择有效的个体化治疗模式;3)蛋白酶抑制剂OPZ对不同基因型肺癌细胞增殖均具有抑制作用,因此可以作为靶向治疗药物单独使用或者联合其他化疗或者靶向药物同时使用,是肺癌患者潜在的治疗药物。