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切花菊观赏价值高,是重要的生产贸易花卉,但在生产过程中白锈病、灰霉病及菊蚜虫等病虫害较为严重,导致切花菊的质量下降。对于切花菊抗病虫害的抗逆性育种研究,传统的育种方式为有性杂交,但存在季节等局限性。建立切花菊悬浮培养体系,通过辐射育种方式,可以得到稳定遗传的、源于个体细胞的突变植株,从而获得抗病虫害的切花菊新品种。本试验以切花菊‘神马’、‘雪山’、‘雪神’、‘粉贵人’、‘黄金’、‘优香’为试材,对影响6个品种愈伤组织诱导和分化的因素进行研究,成功建立了切花菊‘雪山’、‘雪神’、‘粉贵人’、‘优香’悬浮细胞系并进行植板再生,得到切花菊‘雪山’、‘粉贵人’、‘优香’3个悬浮细胞系悬浮细胞再生的试管茁,为菊花辐射育种提供了研究方向和理论依据。通过试验得出以下研究成果:在切花菊6个品种的愈伤组织诱导及分化试验中,在相同培养条件下,诱导悬浮细胞培养初始接种愈伤组织的最适宜品种为切花菊‘粉贵人’,最优的外植体取材为茎段或叶片,最佳的光照强度为12001x。将叶片分别接种在两种培养基KT0.2mg/L+2,4-D1.0mg/L和6-BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L上,均能产生质地较为疏松,增殖速度快的愈伤组织,适于做悬浮培养的初始材料。在诱导切花菊愈伤组织的试验中会产生5种不同形态的愈伤组织,其中,Ⅱ型愈伤组织最适宜作悬浮培养的初始材料。通过石蜡切片观察到胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织两种。在切花菊悬浮细胞系建立的试验中,悬浮培养选用培养液MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.2mg/L,经过35d的无光振荡培养,最终成功建立了切花菊‘粉贵人’Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型悬浮细胞系、‘雪山’、‘雪神’、‘优香’悬浮细胞系共6种悬浮细胞系。悬浮细胞系的生长经历了延迟生长期、对数期、静止期,最佳的起始接种浓度为1.6×103/ml,在此接种浓度下,最佳的继代时间为8d,此时处于细胞增殖的对数期,pH值为5.68。继代培养中,在保留旧液比例为1/3时,细胞的PCV增长倍数最高,达到5.92。对平板培养、固液双层培养和液体悬浮培养三种悬浮细胞再生的方式进行研究,发现液体悬浮培养是切花菊悬浮细胞再生的最佳方式,此时,植板率为0.183,再生时间为30d,再生米色愈伤组织块自径达到1-2mm,且分化能力强。在4℃的温度下处理平板培养的细胞4h,可以使再生频率显著提高。再生愈伤组织分化试验中,最佳的分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L。通过悬浮培养分别对6个悬浮细胞系进行再生试验,结果表明:‘粉贵人’Ⅱ型悬浮细胞系再生愈伤组织的时间最短,且再生的愈伤组织个数最多,愈伤组织的分化能力也较强;而‘雪神’悬浮细胞系未再生出愈伤组织。试管苗的生根和移栽试验中,在相同培养条件下,切花菊‘粉贵人’、‘雪山’、‘优香’悬浮细胞再生植株的最佳生根壮苗培养分别为1/2MS+NAA0.2mg/L、1/2MS+IBA0.2mg/L、1/2MS+IBA0.2mg/L,此时生根质量和出苗质量最优。将3个品种试管苗进行移栽后观察统计得出:‘优香’成活率最高,且植株生长势最好。