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目的研究马钱子碱对人白血病细胞株HL-60细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法1.检测马钱子碱对HL-60细胞的增殖抑制作用：用不同浓度(0、40、80、160、320、640μg/ml)马钱子碱作用HL-60细胞24h、48h、72h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各浓度组的吸光度值,并计算IC50。2.观察马钱子碱作用HL-60细胞后的形态学特征：用不同浓度马钱子碱作用HL-60细胞,48h后应用AO/EB荧光染色,490nm激发波长的荧光显微镜下观察细胞的形态学变化,并计数至少500个细胞。3.细胞水平检测马钱子碱对HL-60细胞的诱导凋亡作用：用不同浓度(0、40、80、160、320、640μg/ml)马钱子碱作用HL-60细胞48小时,应用Annexin V-FITC/PI标记细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果1.马钱子碱对HL-60细胞的生长抑制作用40～640μg/ml马钱子碱作用HL-60细胞后可明显抑制HL-60细胞的增殖,各实验组与对照组在A570nm处的吸光度值(OD)相比,差异具有统计学意义(P<0.01)；40、80.160μg/ml浓度组与320μg/ml浓度组相比均有统计学意义(P<0.01)；640μg/ml浓度组与320μg/ml浓度组相比无统计学意义(P>0.05)；320μg/ml浓度组作用72小时与320μg/ml浓度组作用48h相比差异无统计学意义(P>0.05)。以320μg/ml浓度组作用48h效果最佳,抑制率为86.42%。马钱子碱作用HL-60细胞的IC50为83μg/ml。2.荧光显微镜下HL-60细胞的形态学变化AO-EB荧光染色结果显示对照组大部分细胞大小、形态较均一,胞浆与胞核呈均匀绿色荧光,为未凋亡细胞的形态特征；经320μg/ml马钱子碱作用48h后的HL-60细胞,约80%的细胞核染色质被EB染成桔红色并呈固缩状或圆珠状,显示细胞凋亡形态学特征。3.Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测结果马钱子碱作用48h后,实验组均出现不同程度的凋亡,0、40、80、160、320、640μg/ml浓度组的凋亡率分别为(2.1±1.10)%、(21.3±1.20)%、(38.6±1.30)%、(58.5±4.10)%、(75.3±0.87)%、(66.2±0.75)%,各浓度组的早期凋亡率分别为(0.9±0.14)％、(12.1±0.75)％、(34.9±0.42)％、(44.9±0.28)％、(50.9±1.34)％、(0.0±0.00)％、640μg/ml浓度组有(66.2±0.75)%的细胞出现晚期凋亡,(33.8±1.90)%的细胞死亡,与对照组相比均有统计学意义(P<0.05),各浓度组之间比较均有统计学意义(P<0.05)说明较高浓度的马钱子碱可能直接导致细胞死亡。结论1.马钱子碱具有抑制HL-60细胞生长的作用。马钱子碱可明显抑制HL-60细胞的生长,在0-640μg/ml浓度范围内其抑制作用随药物浓度的增高和作用时间的延长而增大,呈明显的剂量和时间依赖性,以320μg/ml浓度组作用48h效果最佳。马钱子碱作用HL-60细胞的IC50为83μg/ml。2.马钱子碱具有诱导HL-60细胞凋亡的作用。通过应用AO/EB荧光染色、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测法均证实马钱子碱可诱导HL-60细胞凋亡,其诱导凋亡的作用在一定范围内呈剂量效应关系,较高浓度的马钱子碱可直接诱发细胞坏死。3.为今后进一步研究马钱子碱抗白血病作用的分子机制提供一定的实验依据。本实验研究显示马钱子碱有明显抑制HL-60细胞生长的作用,并且该抑制作用可能是通过诱导细胞凋亡所致,这将为今后进一步研究马钱子碱诱导HL-60细胞凋亡的可能途径及抗白血病作用的分子机制提供一定的实验依据。