论文部分内容阅读
蚊虫不仅叮咬骚扰人,还传播多种疾病,如疟疾、登革热、丝虫病、寨卡热和乙型脑炎等。其中,疟疾是危害最严重的蚊媒病,主要由按蚊Anopheles传播,中华按蚊是中国疟疾传播的主要媒介,而且单一以中华按蚊为媒介的疟区呈上升态势,因此阻断中华按蚊对疟疾的传播是控制我国疟疾传播的关键。蚊虫主要通过宿主释放的气味、CO2,以及周围环境的化学信号等线索来追寻宿主、选择配偶和寻找产卵场所,这些化学线索主要依靠化学感受系统感知化学信号。触角、喙和下颚须是蚊虫化学感受系统的重要组成部分,在其上分布着各种不同形态的化学感受器。在化学感受器内部又分布着许多感受气味分子的蛋白因子,蚊虫通过这些因子的相互作用,共同完成化学物质的感受和信号的传递,进而产生行为反应。因而探究蚊虫化学感受系统的分子机制变得尤为重要。迄今为止,冈比亚按蚊、白纹伊蚊、南方库蚊、四斑按蚊和库态按蚊等蚊虫的触角和下颚须等组织已完成转录组测序,采用生物信息学方法鉴定出大量分布于嗅觉器官中的化学感受基因,其中冈比亚按蚊分析最为完善。但有关中华按蚊化学感受基因在不同嗅觉组织间的差异表达尚无报道。本研究利用转录组测序技术分析中华按蚊雌/雄触角、喙、下颚须中化学感受基因的表达谱,以期发现中华按蚊化学感受系统的关键基因,从而为今后研究中华按蚊以化学感受为基础的行为调控机制奠定基础。主要研究结果如下:(1)各组织中表达的化学感受基因数量共注释出109个表达的化学感受基因,其中雌蚊触角(FA)、喙(FP)、下颚须(FM)、整只蚊虫(以下简写为整蚊,FB)表达的化学感受基因数量分别是78、58、41和34;雄蚊触角(MA)、喙(MP)、下颚须(MM)、整蚊(MB)表达的化学感受基因数量分别是79、55、27和34个。雌、雄蚊的触角、喙和整蚊中鉴定出的化学感受基因数量差异很小,但雌蚊下颚须中的化学感受基因数量显著多于雄蚊下颚须。(2)化学感受基因的表达谱中华按蚊化学感受基因呈现明显的组织特异性或偏好性表达模式。在化学感受组织中特异性富集表达的化感基因有67个,在化感组织和非化感组织中广谱性表达的基因有14个。雌蚊偏好性表达的化感基因有43个,雄蚊偏好性表达的化感基因有21个。触角特有化学感受基因31个,分别是AsOBP62、AsOR1、AsOR22、AsOR30等;喙中特有化学感受基因9个,分别是AsOR4、AsGR6、AsGR7、AsIR7x、AsGR26、AsGR36、AsGR60、AsGR63和AsGR71;下颚须特有化学感受基因5个,分别是AsOBP58、AsOR8、AsOR28、AsGR1和AsGR30。表达水平较高的化感基因只在触角筛选到(FPKM值>15),其中雌蚊触角有7个,分别是AsOBP1、AsOBP2、AsOBP4、AsOBP7、AsOBP20b、AsOBP72和AsOR11;雄蚊触角只有AsOBP2高水平表达。触角、喙和下颚须三个嗅觉组织比较,雌蚊中,触角中差异表达的化感基因最多;雄蚊中,喙中差异表达的基因最多。触角是中华按蚊感知外界信息的重要器官,GO注释分析发现,雌蚊触角偏好性表达基因的功能主要富集在嗅觉感知,雄蚊触角偏好性表达基因的功能主要富集在味觉感知,同时雄蚊触角中可能有一种或几种蛋白等量替代了气味结合蛋白在运载气味分子中的功能。(3)特异表达的化学感受基因的功能推测通过表达谱研究,并与其他蚊虫进行比较分析,推测了部分特异性表达的化感基因的功能,比如:AsOR1、AsOBP1、AsOBP2、AsOBP4、AsOBP7、AsOBP20b、AsOBP72和AsOR11等可能在雌蚊追寻、识别宿主过程具有重要作用,AsOBP1和AsOBP4可能在找寻产卵场所中具有重要作用,AsOBP33和AsOBP42具有非嗅觉功能,AsOR37、AsOR40、AsOR52、AsOR58可能在幼虫中具有特定的功能,AsGR58、AsGR46和AsGR3等基因可能与感知气流运动有关。但这些基因的确切功能需要通过实验进一步验证。