论文部分内容阅读
目的探讨RASSF1A甲基化及其蛋白表达与原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展的关系以及RASSF1A甲基化作为一种新的肿瘤分子标志物在HCC早期诊断或无创性诊断中的意义和价值。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测35例HCC患者癌和癌旁组织及其相应血清、5例正常肝组织和10例健康对照血清中RASSF1A启动子区甲基化状况,同时应用组织芯片技术检测98例HCC患者癌和癌旁组织中RASSF1A蛋白的表达。结果(1)HCC患者癌组织RASSF1A启动子区甲基化阳性率为88.6%(31/35),其中完全甲基化者18例,部分甲基化者13例;癌旁肝硬化/慢性肝炎组织为51.4%(18/35),其中完全甲基化者11例,部分甲基化者7例。癌组织的甲基化阳性率远高于癌旁组织,二者差异有统计学意义(P＜0.05)。5例正常肝组织无1例出现RASSF1A基因甲基化。35例HCC患者配对血清样本中RASSF1A启动子区甲基化阳性率为40%(14/35),10份健康对照血清中无1例出现RASSF1A基因甲基化。对HCC癌和癌旁组织中RASSF1A基因甲基化发生情况与患者性别、肝硬化、乙肝、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤大小、有无包膜和门静脉癌栓以及病理分级等临床病理参数之间分析,结果均未发现有统计学相关性。HCC配对血清样本中RASSF1A基因甲基化也未发现与相应的临床病理参数之间有统计学相关性。(2)成功制备了2个组织芯片腊块。芯片总有效率97.4%(191/196),其中HCC组98.0%(96/98)、癌旁组96.9%(95/98)。HCC组织中RASSF1A蛋白表达阳性率为39.58%(38/96),而癌旁组织阳性率为67.37%(64/95),HCC组织中RASSF1A蛋白表达阳性率明显低于癌旁组织,二者差异有统计学意义(P＜0.05)。RASSF1A蛋白表达与HCC患者年龄、AFP水平、有无门脉癌栓,有无包膜浸润及肿瘤结节数等有统计学相关性;与性别、有无肝硬化、HCC分化程度及肿瘤大小等无统计学相关性。结论RASSF1A基因甲基化及其蛋白表达在HCC的发生发展中起重要作用,RASSF1A基因甲基化可能是HCC新的肿瘤分子标志物,检测RASSF1A基因甲基化对早期诊断或无创性诊断HCC有一定的临床意义和价值。